熒光共振能量轉(zhuǎn)移在蛋白質(zhì)折疊研究

2020-09-04 09:35:16

“細胞在進行蛋白質(zhì)折疊的時候會耍很多詭計?!币晾Z大學的研究員說。他們使用激光技術(shù)首次向眾人展示了細胞在蛋白質(zhì)折疊過程的速度及穩(wěn)定性上的調(diào)控是極大的。
Gruebele 教授說,這些受細胞環(huán)境影響的反應過程可能與阿爾茨海默氏癥,亨廷頓氏舞蹈癥,瘋牛病等相似,都是由于蛋白質(zhì)的錯誤折疊或出現(xiàn)非正常的蛋白片段引起的。另一種可能,則與發(fā)燒時發(fā)生的一系列復雜的保護機制相關(guān)。

蛋白


如圖中所示,黃色箭頭所指右邊為正確折疊的蛋白,黃色箭頭所指左邊是未折疊蛋白;蛋白中黃色的部分用紅色熒光受體及綠色熒光供體進行標記,以研究距離及蛋白質(zhì)狀態(tài)。
在研究蛋白折疊過程是,他們使用藍色LED或氬離子激光器激發(fā)供體,應用熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理,測得供體和受體之間的距離。
在顯微鏡下,這兩種熒光信號分別被分為紅色和綠色兩個通道,被CCD收集。試驗中,CCD的采集速度是一幀16.7毫秒,這是硬件的時間分辨率極限。研究者稱,如果使用更快的相機,那么采集一幀圖像的時間可降低到微秒級。
通過體內(nèi)及體外實驗對比,研究者發(fā)現(xiàn)者兩種狀況下的折疊速度是不一樣的。這種差別可能是由于體內(nèi)的狀態(tài)比較擁擠,而試管環(huán)境中的蛋白折疊時沒有壓力。
研究者提到他們的*終目標是在細胞及化學水平上研究溫度對細胞行為等的影響。