普通光學(xué)顯微鏡的使用方法

2020-09-04 09:38:22

(一)顯微鏡的主要構(gòu)造
普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分:機(jī)械部分、照明部分和光學(xué)部分。
1.機(jī)械部分
(1)鏡座:是顯微鏡的底座,用以支持整個(gè)鏡體。
(2)鏡柱:是鏡座上面直立的部分,用以連接鏡座和鏡臂。
(3)鏡臂:一端連于鏡柱,一端連于鏡筒,是取放顯微鏡時(shí)手握部位。
(4)鏡筒:連在鏡臂的前上方,鏡筒上端裝有目鏡,下端裝有物鏡轉(zhuǎn)換器。
(5)物鏡轉(zhuǎn)換器(旋轉(zhuǎn)器):接于棱鏡殼的下方,可自由轉(zhuǎn)動,盤上有3-4個(gè)圓孔,是安裝物鏡部位,轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,可以調(diào)換不同倍數(shù)的物鏡,當(dāng)聽到碰叩聲時(shí),方可進(jìn)行觀察,此時(shí)物鏡光軸恰好對準(zhǔn)通光孔中心,光路接通。
(6)鏡臺(載物臺):在鏡筒下方,形狀有方、圓兩種,用以放置玻片標(biāo)本,中央有一通光孔,我們所用的顯微鏡其鏡臺上裝有玻片標(biāo)本推進(jìn)器(推片器),推進(jìn)器左側(cè)有彈簧夾,用以夾持玻片標(biāo)本,鏡臺下有推進(jìn)器調(diào)節(jié)輪,可使玻片標(biāo)本作左右、前后方向的移動。
(7)調(diào)節(jié)器:是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋,調(diào)節(jié)時(shí)使鏡臺作上下方向的移動。
①粗調(diào)節(jié)器(粗螺旋):大螺旋稱粗調(diào)節(jié)器,移動時(shí)可使鏡臺作快速和較大輻度的升降,所以能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中,通常在使用低倍鏡時(shí),先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。
②細(xì)調(diào)節(jié)器(細(xì)螺旋):小螺旋稱細(xì)調(diào)節(jié)器,移動時(shí)可使鏡臺緩慢地升降,多在運(yùn)用高倍鏡時(shí)使用,從而得到更清晰的物象,并借以觀察標(biāo)本的不同層次和不同深度的結(jié)構(gòu)。


2.照明部分
裝在鏡臺下方,包括反光鏡,集光器。
(1)反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉(zhuǎn)動,它有平、凹兩面,其作用是將光源光線反射到聚光器上,再經(jīng)通光孔照明標(biāo)本,凹面鏡聚光作用強(qiáng),適于光線較弱的時(shí)候使用,平面鏡聚光作用弱,適于光線較強(qiáng)時(shí)使用。
(2)集光器(聚光器)位于鏡臺下方的集光器架上,由聚光鏡和光圈組成,其作用是把光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。
①聚光鏡:由一片或數(shù)片透鏡組成,起匯聚光線的作用,加強(qiáng)對標(biāo)本的照明,并使光線射入物鏡內(nèi),鏡柱旁有一調(diào)節(jié)螺旋,轉(zhuǎn)動它可升降聚光器,以調(diào)節(jié)視野中光亮度的強(qiáng)弱。
②光圈(虹彩光圈):在聚光鏡下方,由十幾張金屬薄片組成,其外側(cè)伸出一柄,推動它可調(diào)節(jié)其開孔的大小,以調(diào)節(jié)光量。


3.光學(xué)部分
(1)目鏡:裝在鏡筒的上端,通常備有2-3個(gè),上面刻有5×、10×或15×符號以表示其放大倍數(shù),一般裝的是10×的目鏡。
(2)物鏡:裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上,一般有3-4個(gè)物鏡,其中*短的刻有“10×”符號的為低倍鏡,較長的刻有“40×”符號的為高倍鏡,*長的刻有“100×”符號的為油鏡,此外,在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線,以示區(qū)別。
在物鏡上,還有鏡口率(N.A.)的標(biāo)志,它反應(yīng)該鏡頭分辨力的大小,其數(shù)字越大,表示分辨率越高,各物鏡的鏡口率如下表:

物鏡 鏡口率(N.A.) 工作距離(mm)
10× 0.25 5.40
40× 0.65 0.39
100× 1.30 0.11

表中的工作距離是指顯微鏡處于工作狀態(tài)(物象調(diào)節(jié)清楚)時(shí)物鏡的下表面與蓋玻片(蓋玻片的厚度一般為0.17mm)上表面之間的距離,物鏡的放大倍數(shù)愈大,它的工作距離愈小。
顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積,如物鏡為10×,目鏡為10×,其放大倍數(shù)就為10×10=100。


(二)顯微鏡的使用方法
1.低倍鏡的使用方法
(1)取鏡和放置:顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中,用時(shí)從柜中取出,右手緊握鏡臂,左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺上,鏡座后端距桌邊1-2寸為宜,便于坐著操作。
(2)對光:用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動),使低倍鏡對準(zhǔn)鏡臺的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動聽到碰叩聲時(shí),說明物鏡光軸已對準(zhǔn)鏡筒中心)。打開光圈,上升集光器,并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源,以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向,直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。
(3)放置玻片標(biāo)本:取一玻片標(biāo)本放在鏡臺上,一定使有蓋玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器彈簧夾夾住,然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋,將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。
(4)調(diào)節(jié)焦距:以左手按逆時(shí)針方向轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處,應(yīng)注意在上升鏡臺時(shí),切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺上升,以免上升過多,造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后,兩眼同時(shí)睜開,用左眼在目鏡上觀察,左手順時(shí)針方向緩慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使鏡臺緩慢下降,直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心,可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心(注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適,可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調(diào)節(jié),如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí),鏡臺下降已*過工作距離(>5.40mm)而未見到物象,說明此次操作失敗,則應(yīng)重新操作,切不可心急而盲目地上升鏡臺。
2.高倍鏡的使用方法
(1)選好目標(biāo):一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心,同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到*清晰的程度,才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。
(2)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,調(diào)換上高倍鏡頭,轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動速度要慢,并從側(cè)面進(jìn)行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片),如高倍鏡頭碰到玻片,說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好,應(yīng)重新操作。
(3)調(diào)節(jié)焦距:轉(zhuǎn)換好高倍鏡后,用左眼在目鏡上觀察,此時(shí)一般能見到一個(gè)不太清楚的物象,可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動約0.5-1圈,即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)
如果視野的亮度不合適,可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié),如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí),必須順時(shí)針(切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降,方可取下玻片標(biāo)本。
3.油鏡的使用方法
(1)在使用油鏡之前,必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察,然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。
(2)將集光器上升到*高位置,光圈開到*大。
(3)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡頭離開通光孔,在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢轉(zhuǎn)動油鏡,在轉(zhuǎn)換油鏡時(shí),從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離,使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。
(4)用左眼觀察目鏡,并慢慢轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找,在加油區(qū)之外重找時(shí)應(yīng)按:低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按:低倍→油鏡程序,不得經(jīng)高倍鏡,以免油沾污鏡頭。
(5)油鏡使用完畢,先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去,然后再用干擦鏡紙擦干凈。


(三)顯微鏡使用的注意事項(xiàng)
1.持鏡時(shí)必須是右手握臂、左手托座的姿勢,不可單手提取,以免零件脫落或碰撞到其它地方。
2.輕拿輕放,不可把顯微鏡放置在實(shí)驗(yàn)臺的邊緣,以免碰翻落地。
3.保持顯微鏡的清潔,光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,機(jī)械部分用布擦拭。
4.水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺,如果沾污應(yīng)立即擦凈。
5.放置玻片標(biāo)本時(shí)要對準(zhǔn)通光孔中央,且不能反放玻片,防止壓壞玻片或碰壞物鏡。
6.要養(yǎng)成兩眼同時(shí)睜開的習(xí)慣,以左眼觀察視野,右眼用以繪圖。
7.不要隨意取下目鏡,以防止塵土落入物鏡,也不要任意拆卸各種零件,以防損壞。
8.使用完畢后,必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi),其步驟是:取下標(biāo)本片,轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開通光孔,下降鏡臺,平放反光鏡,下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關(guān)閉光圈,推片器回位,蓋上綢布和外罩,放回實(shí)驗(yàn)臺柜內(nèi)。*后填寫使用登記表。(注:反光鏡通常應(yīng)垂直放,但有時(shí)因集光器沒提至應(yīng)有高度,鏡臺下降時(shí)會碰壞光圈,所以這里改為平放)