尼康顯微鏡光學(xué)切片與德Sénarmont DIC顯微鏡

尼康顯微鏡光學(xué)切片與德Sénarmont DIC顯微鏡

能力，圖像在去Sénarmont DIC顯微鏡的樣品與大型聚光鏡和物鏡的數(shù)值孔徑能夠從聚焦圖像平面上創(chuàng)造顯著淺淺的光學(xué)部分。無光暈和明亮區(qū)域的橫向面分心強(qiáng)度波動(dòng)的干擾移除焦點(diǎn)，該技術(shù)得到了巧妙地從復(fù)雜的三維相位標(biāo)本切片清晰的圖像。此屬性通常用于獲得蜂窩輪廓脆光學(xué)切片與來自結(jié)構(gòu)的上方和下方的聚焦平面的干擾*小復(fù)合組織。

教程初始化與隨機(jī)選擇的圖像中出現(xiàn)的DIC標(biāo)本圖像窗口和物鏡和標(biāo)本在窗口的右手側(cè)的模型。為了操作的教程，使用物鏡焦點(diǎn)滑塊通過一系列起始于上表面，并通過中央?yún)^(qū)域進(jìn)展到下表面的平面的聚焦樣品。當(dāng)滑塊被翻譯，在檢體的各種圖像平面將被帶進(jìn)銳聚焦。同時(shí)，顯微鏡物鏡模型將向上和向下移動(dòng)相對(duì)于所述試樣，以模擬在顯微鏡的實(shí)際關(guān)系。新的標(biāo)本可以通過從調(diào)色板中選擇檢查選擇的樣本下拉菜單。（奧林巴斯顯微鏡）

在發(fā)射和反射光顯微鏡的所有傳統(tǒng)形式，聚光鏡孔徑光闌在定義圖像對(duì)比度和分辨率的主要作用。減小光圈大小增加了現(xiàn)場(chǎng)和整體圖像銳度的深度，同時(shí)生產(chǎn)對(duì)比度更強(qiáng)。然而，如果聚光鏡隔膜被關(guān)閉太多，衍射工件變得顯而易見并且被犧牲分辨率。通常情況下，*佳的光圈設(shè)置是準(zhǔn)確地之間呈現(xiàn)標(biāo)本細(xì)節(jié)在足夠的對(duì)比度和保留必要的圖像分鐘功能的分辨率，同時(shí)避免衍射文物的妥協(xié)。

當(dāng)聚光鏡可變光闌調(diào)節(jié)至約70％的物鏡后孔的尺寸，*高性能德SénarmontDIC光學(xué)系統(tǒng)產(chǎn)生極好的對(duì)比度。然而，這些顯微鏡也執(zhí)行高檔時(shí)聚光鏡隔膜打開以物鏡后方開口直徑相匹配。為了實(shí)現(xiàn)對(duì)光學(xué)切片實(shí)驗(yàn)的分辨率和對(duì)比度之間的*佳平衡，這是至關(guān)重要的，該顯微鏡進(jìn)行適當(dāng)配置為科勒照明，而諾馬斯基棱鏡組件，分析儀，和德Sénarmont補(bǔ)償器被精確地對(duì)準(zhǔn)。

取的活的光學(xué)切片團(tuán)藻使用去SénarmontDIC達(dá)到上一個(gè)組織培養(yǎng)倒置顯微鏡偏壓相位差菌落被示于圖1中的水生微生物組成數(shù)百至數(shù)千相同的綠藻細(xì)胞具有大致相同的直徑，但組織成幾個(gè)形態(tài)圖案。在菌落的周邊，單個(gè)細(xì)胞被布置在半透明寬間隔層稱為粘液，如圖1（a）中。更遠(yuǎn)的質(zhì)量，菌落形成幾個(gè)集中的球形群體的生殖細(xì)胞，稱為gonidia，其母公司殖民地內(nèi)生產(chǎn)的小女兒的殖民地（圖1（b））。作為在顯微鏡被聚焦于粘液菌落的*上層上（圖1（c）），結(jié)構(gòu)的細(xì)節(jié)在各個(gè)細(xì)胞變得可見，但是許多細(xì)胞通過子菌落掩蔽。

薄生物標(biāo)本（10?20微米厚）通常以較低的放大倍率產(chǎn)生較差的光學(xué)部分，但往往揭示重大內(nèi)部細(xì)節(jié)時(shí)，用具有大數(shù)值孔徑（60倍和100倍），高倍率的物鏡可視化。較厚的樣品可容易地切開低放大倍數(shù)，其中像差被*小化。收集從較厚生物標(biāo)本的光學(xué)部分，尤其是那些浸在食鹽水或緩沖溶液，通常是由折射率不連續(xù)性，在玻璃蓋和安裝介質(zhì)之間的界面上產(chǎn)生的球面像差的阻礙。這件神器將降低分辨率的光學(xué)部分系列更高的穿透深度。