尼康顯微鏡藍(lán)色激發(fā)塊B-3A（長波輻射）
尼康的B-3A熒光濾波器組配有一個(gè)很寬的激發(fā)帶通范圍（70納米），可提供寬得多的吸收窗比任何在藍(lán)色激勵(lì)系列中的其他組合。 紫外，可見和近紅外透射此長通發(fā)射濾波器組合頻譜剖面，在圖1下圖所示的寬激發(fā)帶使濾波器組與鹵鎢燈照射可以采用，雖然它也與電弧放電有用調(diào)查有非常微弱的信號(hào)探頭時(shí)燈。 所述長通屏障（發(fā)射）濾波器具有520納米的截止波長，并且能夠從綠色，黃色，橙色和紅色熒光團(tuán)具有在藍(lán)色波長區(qū)域的吸收帶傳送顯著量的信號(hào)的。 類似此類中的其他過濾器的組合，在B-3A具有長通雙色鏡切，在505納米的波長。
藍(lán)色激發(fā)濾光片座B-3A規(guī)格：
激發(fā)波長篩選：420-490納米（帶通，455 CWL）
雙色鏡截止波長：505納米（長通，LP）
屏障過濾波長：520納米截止點(diǎn)（長通，LP）
包含在B-3A組合的長通發(fā)射濾波器透射比任何對(duì) E -系列過濾器集顯著更多的信號(hào)，并且比得上在藍(lán)色激勵(lì)類的其他長通（B-1A和B-2A）的組合（具有異常顯示高得多的噪聲電平的）。該組的目的是使采用鎢 - 鹵素?zé)粽彰饔糜诩ぐl(fā)在藍(lán)色光譜區(qū)的熒光，并采用一個(gè)二色鏡，用于在綠色，黃色，橙色發(fā)射的熒光發(fā)射進(jìn)行了優(yōu)化，和紅色區(qū)域。 在505納米的二色鏡截止波長加上長通屏障過濾器（切上的520納米波長）是類似的其他藍(lán)激發(fā)濾光片組合。
由B 3A濾波器集合產(chǎn)生的圖像是非常明亮的（特別是與電弧放電照明），但有一個(gè)顯著低信噪比比得到利用帶通發(fā)射濾波器濾波的圖像。 其結(jié)果是，背景區(qū)域是比那些從帶通發(fā)射濾波器打火機(jī)，或在某些情況下，從其他長通濾波器的組合（取決于照明源和其它因素）。 在綠色，黃色，橙色，和紅色區(qū)域的熒光發(fā)射是在利用B-3A濾波器組合采集到的圖像經(jīng)?？梢姡▍⒁妶D2）。 吖啶橙，吖啶紅，將Alexa Fluor 430的Alexa Fluor 488，葉綠素（自發(fā)熒光），熒光探針，LysoTracker衍生物，膦，阿的芥末，塞夫龍河探頭和四環(huán)素：調(diào)查以下熒光團(tuán)時(shí)，這套建議。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對(duì)不同細(xì)胞內(nèi)位置藍(lán)色吸收熒光探針的這種過濾器組合的性能。 在一般情況下，用B-3A濾波器組合而生成的圖像顯示出比與其它的藍(lán)色激發(fā)套觀察多得多的背景信號(hào)。
示于圖2（a）是從大鼠袋鼠的培養(yǎng)（PTK2）上皮細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記的同隨后綴合的Alexa Fluor山羊抗-小鼠Fab片段初級(jí)抗牛的α-微管蛋白的小鼠單克隆抗體的熒光發(fā)射強(qiáng)度488.*大吸收的Alexa Fluor 488的是495納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在519納米。 需要注意的是在整個(gè)細(xì)胞質(zhì)中并進(jìn)入兩個(gè)子細(xì)胞之間的中間體延伸的細(xì)胞內(nèi)微管網(wǎng)絡(luò)的突出染色。 另外，將試樣同時(shí)染色核蛋白質(zhì)CDC6（偶聯(lián)至太平洋藍(lán)），以及用于F-肌動(dòng)蛋白與鬼筆環(huán)肽從藍(lán)色綴合的Alexa Fluor 568注缺席信號(hào)（太平洋藍(lán)）的熒光團(tuán)，這是不有效地激發(fā)在該波長區(qū)域。然而，來自紅色熒光探針顯著量信號(hào)（的Alexa Fluor 568）所用的皮層中觀察到。(奧林巴斯顯微鏡)
由薄小鼠腎臟的部分標(biāo)記與多個(gè)（3）的熒光團(tuán)的熒光發(fā)射被示出在圖2（b）。 在組織切片細(xì)胞核靶向與核酸探針的DAPI，當(dāng)在細(xì)胞培養(yǎng)物和組織切片結(jié)合到DNA，其具有*大激發(fā)在358納米，并且具有發(fā)射*大值在461納米。 另外，低溫恒溫器部也同時(shí)沾上的Alexa Fluor 488麥胚凝集素（腎小球和曲小管）和Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽（絲狀肌動(dòng)蛋白和刷狀緣）。 注意沒有信號(hào)從藍(lán)色（DAPI）熒光團(tuán)，但紅色的顯著水平（的Alexa Fluor 568）熒光滲出通過在圖像的許多區(qū)域。
圖2（c）和圖2（e）描繪的中國麂皮鹿皮標(biāo)記的Alexa Fluor 488（圖2的（c））和SYTOX綠（圖2（e））的成纖維細(xì)胞。 將細(xì)胞在如圖2（c）中免疫熒光標(biāo)記的同隨后綴合的Alexa Fluor山羊抗-小鼠Fab片段初級(jí)抗OXPHOS復(fù)合V抑制蛋白的單克隆抗體（鼠）488.此外，將試樣同時(shí)染色F-肌動(dòng)蛋白的Alexa Fluor 350（藍(lán)色）綴合到鬼筆環(huán)肽，并用于DNA與SYTOX橙。 注意信號(hào)的同時(shí)從橙色和綠色熒光團(tuán)，但不存在任何顯著發(fā)光強(qiáng)度從的Alexa Fluor 350，這是不能有效地激發(fā)的藍(lán)色波長區(qū)域的存在。 在許多情況下，SYTOX橙染色多種除了DNA的細(xì)胞質(zhì)的元素，如在圖像中是顯而易見的。
SYTOX綠被用來染色的染色質(zhì)在圖2（E）顯示的細(xì)胞的細(xì)胞核。 *大吸收的SYTOX Green是504納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在523納米。 另外，將試樣同時(shí)標(biāo)記與初級(jí)抗人氧化磷酸化復(fù)合物V抑制蛋白的小鼠單克隆隨后偶聯(lián)于太平洋藍(lán)（*大吸收在410納米）的山羊抗小鼠Fab片段的抗體。 肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)也被標(biāo)記鬼筆環(huán)肽綴合的Alexa Fluor 568注高信號(hào)電平的存在下從紅色（的Alexa Fluor 568）的熒光團(tuán)，但是從太平洋藍(lán)，非常弱的熒光發(fā)射強(qiáng)度是不能有效地激勵(lì)這光譜區(qū)域。
由薄蕨類根莖部分自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度（ 全緣貫眾 ）組織示于圖2（f）所示。 在植物組織中的內(nèi)源性的自發(fā)熒光產(chǎn)生于各種生物分子，包括葉綠素，β-胡蘿卜素，葉黃素和。 在藍(lán)色區(qū)域，葉綠素具有吸收帶，具有高消光系數(shù)，并產(chǎn)生一個(gè)顯著量熒光在與420和460納米之間的波長激發(fā)。 注意頻譜滲出通過從自體熒光發(fā)射在黃色和紅色光譜區(qū)域用B-3A濾波器組合的存在。