尼康顯微鏡藍(lán)紫色激發(fā)塊CFP（帶通）
高性能尼康CFP（青色熒光蛋白）濾波器的組合通過采用帶通發(fā)射濾波器，其40納米的通帶（460-500納米）限制檢測到的熒光發(fā)射在不同于藍(lán)紫組中的其他三個補(bǔ)青藍(lán)光譜區(qū)域。 紫外，可見和近紅外透射該濾波器組的頻譜輪廓下面示于圖1，一種窄的20納米的激發(fā)最小化通帶和自發(fā)熒光是為了避免通常用于雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中使用的青色結(jié)合某些熒光染料的激發(fā)熒光蛋白。 雖然主要設(shè)計(jì)用于熒光蛋白的成像，此帶通發(fā)射組合是用于獲得具有多個標(biāo)簽標(biāo)本圖像時熒光團(tuán)中的一個是有效地激發(fā)，在藍(lán)紫色光譜區(qū)域是有用的。
藍(lán)紫色激發(fā)濾光片座CFP規(guī)格：
激發(fā)波長篩選：426-446納米（帶通，436 CWL）
雙色鏡截止波長：455納米（長通，LP）
屏障過濾波長：460-500納米（帶通，480 CWL）
在CFP熒光濾波器集合被設(shè)計(jì)以獲得最佳性能與由藍(lán)紫色波長激發(fā)青色熒光蛋白，特別是當(dāng)用于在組合的雙標(biāo)記技術(shù)具有增強(qiáng)的黃色熒光蛋白利用。 雖然最初設(shè)計(jì)為從蛋白質(zhì)的熒光團(tuán)檢測發(fā)射，該過濾器組合實(shí)質(zhì)上是一種帶通發(fā)射藍(lán)紫激發(fā)集，并且可以被用于檢查一個寬的吸收光在此光譜區(qū)域的標(biāo)本光譜。
在CFP組合的激發(fā)帶通一般不激發(fā)黃色熒光蛋白（激發(fā)在513納米），并通過采用帶通發(fā)射濾波器，黃色熒光被排除的檢測時在CFP濾波器集合被使用。 應(yīng)當(dāng)指出的是，從增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的一些信號可能與此濾波器集合檢測到，并且因此該熒光是不是一個好的候選為與青色蛋白質(zhì)變體的雙標(biāo)記。 在濾波CFP組合建議研究以下熒光團(tuán)時：ACMA，吖啶同型二聚體，Astrazon黃色，Atabrine，兒茶酚胺，CFP，色霉素A，Genacryl嫩黃，Genacryl黃色，塞夫龍河黃色，SYTO 42（43，44，45），和SYTOX藍(lán)色。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明該過濾器組合的性能與各種定位于不同的細(xì)胞內(nèi)位置藍(lán)紫吸收熒光探針。
示于圖2（a）是從大鼠胸主動脈（肌肉）的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記的同隨后綴合的山羊抗小鼠Fab片段初級抗OXPHOS復(fù)合V抑制蛋白的單克隆抗體（小鼠）的培養(yǎng)的熒光發(fā)射強(qiáng)度太平洋藍(lán)。 最大吸收太平洋藍(lán)的是410納米，并且最大發(fā)射發(fā)生在455納米。 另外，將試樣同時染色綴合鬼筆環(huán)肽F-肌動蛋白的Alexa Fluor 488（綠色），以及用于DNA與SYTOX橙。 注意沒有信號的同時從橙色和綠色熒光團(tuán)（SYTOX定位于細(xì)胞核會出現(xiàn)這些觀察條件下綠色）。 在許多情況下，SYTOX橙染色多種除了DNA的細(xì)胞質(zhì)的元素，盡管這不是顯而易見的圖像中。（奧林巴斯顯微鏡）
圖2（b）展示了從大鼠骨骼肌組織細(xì)胞（L6細(xì)胞系;成肌細(xì)胞）的培養(yǎng)熒光發(fā)射該被免疫熒光標(biāo)記與綴合到Alexa的初級抗牛的α-微管蛋白的小鼠單克隆抗體，隨后用山羊抗小鼠Fab片段氟430.最大吸收的Alexa Fluor 430的是431納米，并且最大發(fā)射發(fā)生在541納米。 雖然細(xì)胞內(nèi)微管網(wǎng)絡(luò)使用這個協(xié)議重染色，在CFP組合帶通濾波器不通過大量的熒光發(fā)射的來自的Alexa Fluor 430，并產(chǎn)生只有微弱的信號被集中靠近核。 另外，將試樣同時染色F-肌動蛋白的Alexa Fluor 488綴合鬼筆環(huán)肽，以及用于線粒體與MitoTracker紅CMXRos。 注意沒有信號從紅色（MitoTracker）和綠色（Alexa Fluor 488）的熒光團(tuán)。
從DAPI染色，它的目標(biāo)在細(xì)胞核DNA牛肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)熒光發(fā)射強(qiáng)度，是在圖2（c）所示。 最大吸收的DAPI（4'，6-二脒基-2-苯基吲哚）為358納米，并且當(dāng)熒光被綁定到DNA中的最大發(fā)射發(fā)生在461納米。 另外，將試樣同時沾上BODIPY FL phallacidin（靶向肌動蛋白;綠色發(fā)光）和MitoTracker紅CMXRos（靶向線粒體;紅色發(fā)光）。 注意沒有信號從紅色（MitoTracker）熒光團(tuán)，但滲出通過從綠色（BODIPY FL）探針，其顯示為圍繞原子核的弱青色信號。 此外，核出現(xiàn)那么激烈，用熒光發(fā)射移位到較長波長比可比的圖像與尼康紫羅蘭和紫外線濾光片組合。
原子核中的小鼠腎薄組織切片（圖2（d））的進(jìn)行了針對性的核酸探針的DAPI，當(dāng)在細(xì)胞培養(yǎng)物和組織切片結(jié)合到DNA，其具有最大激發(fā)在358納米和發(fā)射最大值在461納米。 此外，在圖2（d）該低溫恒溫器部也同時沾上的Alexa Fluor 488麥胚凝集素（腎小球和曲小管）和Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽（絲狀肌動蛋白和刷狀緣）。 注意沒有信號從紅色（的Alexa Fluor 568）的熒光團(tuán)，但顯著量滲透入來自綠色（的Alexa Fluor 488）探針青色發(fā)射濾光片。 用紫外線激發(fā)帶通發(fā)射濾光片組，在試樣的暗核會出現(xiàn)明亮的藍(lán)色和的Alexa Fluor 488信號將基本上不存在。
圖2（e）表示從大鼠袋鼠腎上皮細(xì)胞（PTK2線路）進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記與初級抗細(xì)胞角蛋白（一種中間絲蛋白）的小鼠單克隆抗體的培養(yǎng)，隨后用綴合的山羊抗小鼠Fab片段的發(fā)光強(qiáng)度濱海藍(lán)色。 最大吸收碼頭藍(lán)的是365納米，并且最大發(fā)射發(fā)生在460納米。 另外，將試樣同時染色線粒體與MitoTracker紅CMXRos。 注意沒有信號從紅色熒光團(tuán)與該帶通發(fā)射濾波器的組合。 還應(yīng)當(dāng)指出，在與在CFP濾波器集合較弱信號的缺乏，在藍(lán)紫色區(qū)域的結(jié)果顯著吸收匡藍(lán)的。
由薄蕨類球果部分自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度（ 全緣貫眾 ）組織表現(xiàn)出如圖2（f）所示。 在植物組織中的內(nèi)源性的自發(fā)熒光產(chǎn)生于各種生物分子，包括木質(zhì)素，葉綠素，β-胡蘿卜素，葉黃素和。在藍(lán)紫色區(qū)域中，葉綠素具有吸收帶，具有高消光系數(shù)，并產(chǎn)生一個顯著量熒光在與400和440納米之間的波長激發(fā)。 注意沒有光譜滲出通過從自體熒光發(fā)射在綠色和紅色光譜區(qū)域與CFP濾波器組合。