徠卡顯微鏡干燥生物樣品準(zhǔn)備的顯微分析
X射線微型計(jì)算機(jī)斷層掃描（micro-CT）是一種常規(guī)應(yīng)用于非侵入性技術(shù)為生物體的內(nèi)部解剖和形態(tài)的調(diào)查。作為micro-CT的結(jié)果掃描一疊的灰度圖像由一系列在限定的角度時(shí)樣品旋轉(zhuǎn)采取突起產(chǎn)生的。自從幾年基于實(shí)驗(yàn)室的micro-CT成像系統(tǒng)的數(shù)量不斷增長使這種技術(shù)可用于研究和應(yīng)用的廣譜。
類似的如掃描電子顯微鏡等成像技術(shù)，micro-CT允許研究生物樣品中幾乎所有的條件（如鮮，干或防腐劑內(nèi)）。micro-CT是理想的技術(shù)為研究骨骼，牙齒和貝殼在3D，但軟組織的分析，顯著影響，根據(jù)化合物與低原子序數(shù)元素的存在下通過其低的吸收對比度阻礙。為了克服此限制，幾種方法可以應(yīng)用于包括不同的染色和/或干燥技術(shù)以及相相關(guān)對比成像。但是，只要有可能樣品應(yīng)在干燥條件下進(jìn)行分析，因?yàn)樗峁┮粋€(gè)顯著更高的信噪比相比掃描在液體樣品。 為了干燥細(xì)膩的生物樣品，臨界點(diǎn)干燥被校對是* 好的方法相比例如，化學(xué)或空氣干燥，因?yàn)樗Ａ袅私Y(jié)構(gòu)，同時(shí)盡量減少工件，如組織和失真的收縮。
書蝎子肌肉微型計(jì)算機(jī)斷層掃描協(xié)議
介紹
種類：書蝎（Neobisium SP）。
書蝎與隨后的X射線顯微計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)（micro-CT）的臨界點(diǎn)干燥來檢測解剖特征，特別考慮到肌肉組織。
步驟
樣品架：樣品轉(zhuǎn)移到微多孔樣品鍋中，并置于濾盤和多孔盆保持器的腔室。
固定和脫水
乙醇（70％）：過夜
乙醇系列（80％，90％，96％，100％）：2×10分鐘。
碘染色（在100％乙醇1％碘溶液）：過夜
乙醇（100％）：2×10分鐘。
CPD300自動(dòng)程序
安裝和掃描
干燥樣品膠合昆蟲銷和掃描用Xradia MicroXCT-200 X射線成像系統(tǒng)（卡爾蔡司X射線顯微公司，普萊森頓，美國）。
圖1：一本書蝎子prosoma的容積重建（外視圖和內(nèi)視圖以可視化的肌肉）。伊麗莎白禮貌和Lipke彼得·米哈利克博士，格賴夫斯瓦爾德，德國大學(xué)。
昆蟲的腦的微型計(jì)算機(jī)斷層掃描協(xié)議
介紹
種類：吹飛（絲光綠愷撒）
吹的臨界點(diǎn)干燥，隨后的X射線顯微計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)（micro-CT），飛來檢測神經(jīng)解剖學(xué)特征。
步驟
樣品支架：將樣品分別放置在節(jié)肢動(dòng)物保持器的腔室。
固定和脫水
布安固定液：隔夜
0.1M磷酸鹽緩沖液（1.8％蔗糖，pH值7.2）：3×10分鐘。
乙醇系列（60％，70％，80％，90％，96％，100％）：2×10分鐘。
碘染色（在100％乙醇1％碘溶液）：過夜
乙醇（100％）：2×10分鐘。
CPD300自動(dòng)程序
安裝和掃描
干燥的樣品被粘在昆蟲銷和掃描用Xradia MicroXCT-200 X射線成像系統(tǒng)（卡爾蔡司X射線顯微公司，普萊森頓，美國）。
圖2：容積重建和擊飛的頭部和大腦的虛擬部分。伊麗莎白禮貌和Lipke彼得·米哈利克博士，格賴夫斯瓦爾德，德國大學(xué)。
昆蟲幼蟲的微型計(jì)算機(jī)斷層掃描協(xié)議
介紹
品種：紅血蟲（搖蚊幼蟲）
蚊幼蟲與隨后的X射線顯微計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)（micro-CT）的臨界點(diǎn)干燥以重構(gòu)內(nèi)解剖結(jié)構(gòu)。
步驟
樣品架：樣品分別放置在節(jié)肢動(dòng)物持有人的商會(huì)。（奧林巴斯顯微鏡）
固定和脫水
2.5％戊二醛（于0.1M磷酸鹽緩沖液）：過夜
0.1M磷酸鹽緩沖液（1.8％蔗糖，pH值7.2）：3×10分鐘。
乙醇系列（60％，70％，80％，90％，96％，100％）：2×10分鐘。
碘染色（在100％乙醇1％碘溶液）：過夜
乙醇（100％）：2×10分鐘。
CPD300自動(dòng)程序
安裝和掃描
干燥樣品膠合昆蟲銷和掃描用Xradia MicroXCT-200 X射線成像系統(tǒng)（卡爾蔡司X射線顯微公司，普萊森頓，美國）。
圖3：容積重建和紅血蟲呈現(xiàn)出多種器官系統(tǒng)的虛擬部分。伊麗莎白禮貌和Lipke彼得·米哈利克博士，格賴夫斯瓦爾德，德國大學(xué)。