徠卡顯微鏡熒光染料
在熒光顯微鏡的基本原理是細(xì)胞成分有熒光劑的幫助的非常具體的可視化。這可以是熒光蛋白 - 例如綠色熒光蛋白 - 基因與感興趣的蛋白質(zhì)。如果克隆是不可能的 - 例如組織學(xué)標(biāo)本中 - 這是需要使用其他技術(shù)，如免疫熒光染色來(lái)可視化目的蛋白質(zhì)。用于此目的的抗體的利用，這是可以直接或間接地連接到不同的熒光染料和結(jié)合到適當(dāng)?shù)哪繕?biāo)結(jié)構(gòu)。此外，與熒光染料的徠卡顯微鏡的幫助下，不僅限于蛋白，但它也提供了機(jī)會(huì)染色核酸，多糖和其他結(jié)構(gòu)?？梢詸z測(cè)甚至非生物物質(zhì)，如鈣離子。本文介紹了常用的熒光劑。
熒光免疫
在熒光顯微鏡有兩種方式來(lái)可視化你的目標(biāo)蛋白。無(wú)論是與一個(gè)固有熒光信號(hào)的幫助下 - 這意味著通過(guò)克隆，因此基因連接的熒光蛋白與靶蛋白?；蚪柚鸁晒鈽?biāo)記的特異性結(jié)合到感興趣的蛋白質(zhì)的抗體。對(duì)于一些生物的問(wèn)題是比較有用的，甚至需要進(jìn)行后者。在組織學(xué)樣品的情況下，例如，它不可能使用的，因?yàn)樵谝话愕臉悠繁粡钠渲胁怀钟腥魏螣晒獾鞍椎纳飦?lái)源的熒光蛋白。此外，如果一個(gè)有效的抗體可用，免疫比熒光蛋白技術(shù)快得多，是你要克隆的興趣和轉(zhuǎn)染的DNA的基因插入到適當(dāng)?shù)募?xì)胞。熒光蛋白的另一個(gè)缺點(diǎn)在于身為蛋白質(zhì)本身的性質(zhì)。有了它，它們具有可導(dǎo)致功能障礙或誤解關(guān)于感興趣的附著蛋白的細(xì)胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)性的特點(diǎn)。然而，應(yīng)當(dāng)認(rèn)為，使用熒光蛋白是通常選擇的方法來(lái)觀察活細(xì)胞。
免疫熒光法利用抗體與其抗原的非常特異性結(jié)合親和力的。這可以有兩種不同的外觀。最簡(jiǎn)單的方法是使用一種被結(jié)合到感興趣的蛋白的熒光標(biāo)記的抗體。這就是所謂的直接免疫熒光。
在大多數(shù)情況下，有兩種形式的抗體的使用。第一個(gè)結(jié)合靶蛋白并沒(méi)有熒光標(biāo)記本身（第一抗體）。但是，第二個(gè)（第二抗體），其結(jié)合第一抗體特異性帶有熒光染料。這種方法被稱(chēng)為間接免疫熒光和具有若干優(yōu)點(diǎn)。一方面有一個(gè)放大的效果，因?yàn)槎嘤谝粋€(gè)的第二抗體結(jié)合于一個(gè)第一抗體。另一方面，沒(méi)有必要所有的時(shí)間標(biāo)記每個(gè)抗體對(duì)您喜歡的蛋白與熒光染料而使用的商業(yè)熒光標(biāo)記的第二抗體。廣泛使用的熒光染料的免疫是FITC，TRITC或都提到了以下幾個(gè)Alexa的Fluor?染料。
FITC 和TRITC
異硫氰酸熒光素（FITC）是有機(jī)熒光染料仍然在免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)使用。它的激發(fā)/發(fā)射峰在517分之495nm和可耦合到不同的抗體，其反應(yīng)性異硫氰酸酯基，其上結(jié)合的蛋白質(zhì)的氨基，巰基，咪唑基，酪氨?；螋驶膸椭?。它的基本形式 - 熒光素 - 具有332克/摩爾的摩爾質(zhì)量，并經(jīng)常被用來(lái)作為熒光示蹤劑。 FITC（388克/摩爾），這是用于熒光顯微鏡和服務(wù)為原點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)一步的熒光染料類(lèi)的AlexaFluor?488第一的染料之一。其熒光活性是由于其大的共軛芳族電子系統(tǒng)，它是由光的藍(lán)色光譜激發(fā)。
圖1：果蠅胚胎發(fā)育，綠色：FITC，紅色：TRITC 圖2：小鼠成纖維細(xì)胞，綠色F-肌動(dòng)蛋白，F(xiàn)ITC Red：Tubulin, Cy5, 藍(lán)色：細(xì)胞核，DAPI
很多時(shí)候同日而語(yǔ)用FITC使用的染料是它的發(fā)音相似的伙伴T(mén)RITC（四甲-5（6）-isothiocyanate）。相反，F(xiàn)ITC，TRITC不是熒光素，但羅丹明家族的衍生物。羅丹明也有一個(gè)大的共軛芳族電子系統(tǒng)，是什么導(dǎo)致了它們的熒光行為。相反，F(xiàn)ITC，TRITC（478克/摩爾）為激發(fā)光在綠色光譜，最大在550nm處。其最大發(fā)射是在撒謊，在573納米。鍵合到蛋白質(zhì)（如抗體）也基于反應(yīng)性異硫氰酸酯基團(tuán)。
即使FITC和TRITC仍然在使用，它們是相當(dāng)弱的熒光染料和不推薦用于本領(lǐng)域顯微鏡的狀態(tài)。他們的利潤(rùn)是根據(jù)自己的經(jīng)濟(jì)代價(jià)。
花青
這種相對(duì)小集合熒光染料是來(lái)自菁這也是起源于他們的名字的Cy2，Cy3，Cy5和Cy7標(biāo)記。所有的人都可以通過(guò)它們的反應(yīng)性基團(tuán)被連接到核酸或蛋白質(zhì)。對(duì)于蛋白質(zhì)性標(biāo)簽使用的馬來(lái)酰亞胺基團(tuán)，例如。有趣的 - 有關(guān)熒光 - Cy5的是其電子周?chē)舾?。這可以用于酶測(cè)定。的附連蛋白導(dǎo)致正的或負(fù)的變化中的熒光發(fā)射的構(gòu)象變化。此外Cy3和Cy5可用于FRET實(shí)驗(yàn)?；ㄇ嗳玖鲜潜容^老的熒光染料和依據(jù)其他熒光染料具有改進(jìn)的亮度，耐光性，量子產(chǎn)率等。
Alexa Fluor?染料
Alexa Fluor?染料這是經(jīng)常使用的熒光顯微鏡一大群的帶負(fù)電荷的親水性和熒光染料。他們的稱(chēng)謂可追溯到它的發(fā)明者理查德·保羅·豪格蘭誰(shuí)任命他的兒子亞歷克斯畢浩然后的染料。該標(biāo)簽是分子探針（生命技術(shù)的附屬公司）的注冊(cè)商標(biāo)。此外，各激光的激發(fā)波長(zhǎng)中提到他們的標(biāo)簽。例如在非常廣泛使用的AlexaFluor?488具有最大激發(fā)，在493納米，它允許勵(lì)磁用標(biāo)準(zhǔn)488nm的激光。 Alexa Fluor?488具有發(fā)射最大值在519納米。與此特征，Alexa Fluor?488具有非常相似的性質(zhì)，以FITC。雖然Alexa Fluor?488是熒光素衍生物，而相比之下，F(xiàn)ITC它具有更好的穩(wěn)定性，亮度和較低的pH敏感性。所有的AlexaFluor?染料是不同的基本的熒光物質(zhì)如熒光素，香豆素類(lèi)，花青或羅丹明（如Alexa Fluor?546，Alexa Fluor?633）的磺化形式。它們的摩爾質(zhì)量范圍為410至1400克/摩爾。
圖3：轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎，interlimb體節(jié)，在10.5天的轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎的五interlimb體節(jié)：EpaxialMyf5綠色熒光蛋白;免疫染色的GFP-Alexa的488;沾上結(jié)蛋白，Cy3的胚胎肌纖維，細(xì)胞核被發(fā)現(xiàn)用Hoechst大小從上到下：3.5毫米（一），800微米（B）。奧莉喬瑞，Cellules Souches與發(fā)展協(xié)會(huì)，巴斯德研究所，法國(guó)巴黎和IGBMC，IGBMC成像中心：禮貌
圖4：小鼠成纖維細(xì)胞，綠色F-肌動(dòng)蛋白，F(xiàn)ITC紅：微管蛋白，Cy5 ，藍(lán)色：細(xì)胞核的DAPI。君特·吉斯博士，馬普醫(yī)學(xué)研究所，德國(guó)海德堡：禮貌
DNA染色
在熒光顯微鏡不僅蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的利益，也有核酸。有時(shí)有必要通過(guò)其核的檢測(cè)，以確定細(xì)胞的確切位置或數(shù)量。一種最常見(jiàn)的DNA污斑是DAPI（4'，6 - 二脒-2 - 苯基吲哚），其結(jié)合在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的豐富的區(qū)域。 DAPI熒光強(qiáng)度增加，如果附著的DNA相比，其未綁定狀態(tài)。據(jù)興奮紫外光，最大的358納米。發(fā)射譜很廣，在461 nm的峰值。弱熒光，也可用于RNA結(jié)合檢測(cè)。在這種情況下，發(fā)射偏移到500nm。有趣的是，DAPI是能夠滲透完整的細(xì)胞膜。因此，它可以在固定，以及在活體細(xì)胞中。
第二個(gè)廣泛使用的DNA染色方法是染料Hoechst公司，它最初是由化工企業(yè)赫斯特公司生產(chǎn)的家庭。赫斯特33258，赫斯特33342，和赫斯特34580頃雙 - benzimides與嵌入傾向的AT豐富的地區(qū)，于是后者不使用非常頻繁。類(lèi)似DAPI它們通過(guò)紫外光激發(fā)而具有發(fā)射最大值在455納米，它被移動(dòng)到510-540毫微米以未結(jié)合狀態(tài)。 Hoechst的污漬也被細(xì)胞滲透性，可以在固定和活細(xì)胞，因此可以使用。的差異，以DAPI是其較低的毒性。
一種膜防滲的DNA染色是丙啶，碘化物。它，它通常用于在細(xì)胞培養(yǎng)活細(xì)胞和死細(xì)胞之間進(jìn)行區(qū)分，因?yàn)樗荒芾鲜沁M(jìn)入完整細(xì)胞。 Propidium-碘化物也嵌入劑，但沒(méi)有約束力的偏好不同的堿基。在核酸結(jié)合的狀態(tài)下，其最大激發(fā)是在538納米。最高排放為617納米。未綁定丙啶，碘激發(fā)和發(fā)射最大值被移到較低的波長(zhǎng)和強(qiáng)度較低。它也可以結(jié)合RNA，而不改變它的熒光特性。區(qū)分的RNA的DNA，需要使用適當(dāng)?shù)暮怂崦浮?nbsp;
染料，其能夠使以前無(wú)操縱的DNA和RNA之間的差是吖啶橙。它的激發(fā)/發(fā)射最大對(duì)在DNA的破解版502納米/525納米和轉(zhuǎn)向460納米/650納米的綁定RNA的狀態(tài)。此外，它能夠進(jìn)入酸性隔室等溶酶體。有陽(yáng)離子染料被質(zhì)子化。在此酸性吖啶橙周?chē)还庠谒{(lán)色光譜激發(fā)的，而發(fā)射是最強(qiáng)的橙色區(qū)域。由于細(xì)胞凋亡有很多吞沒(méi)酸性車(chē)廂這使得它經(jīng)常被用來(lái)標(biāo)記那些類(lèi)型的細(xì)胞。
艙和細(xì)胞器的特定染料
圖5：Pukinje細(xì)胞，小鼠小腦皮質(zhì)的三重標(biāo)記矢狀竇旁一節(jié)。紅色：抗鈣結(jié)合蛋白-D28K/ Cy3的，綠色環(huán)保：抗GFAP/ Cy5的，藍(lán)色：赫斯特33258
圖6：牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞。紅色：線粒體標(biāo)記MitoTracker?紅CMXRos，綠色F-肌動(dòng)蛋白標(biāo)記的綠色熒光BODIPY?FL phallacidin，藍(lán)色：DAPI標(biāo)記的細(xì)胞核。使用3D盲解卷積此圖像增強(qiáng)
在熒光顯微鏡中是經(jīng)常合理染色細(xì)胞區(qū)室像溶酶體或內(nèi)體和細(xì)胞器像線粒體。為此，有將在本節(jié)中提到的具體可用染料的調(diào)色板。
一種公知的方法來(lái)觀察線粒體是MitoTracker?的利用率。這是一種細(xì)胞滲透性染料有輕微巰基反應(yīng)性氯部分。有了它，就可以通過(guò)共價(jià)鍵與半胱氨酸殘基的游離巰基反應(yīng)結(jié)合到基質(zhì)蛋白。 MitoTracker?存在以不同的顏色和修改（第表1）和是Molecular Probes公司的一個(gè)注冊(cè)商標(biāo)。相反，如羅丹明123或tetramethylrosamine傳統(tǒng)線粒體特定污漬，MitoTracker?不破壞膜電位與固定劑后沖了出去。
根據(jù)線粒體的污漬也有染料標(biāo)記的酸性區(qū)室像溶酶體被稱(chēng)為L(zhǎng)ysoTracker。這些都是鏈接到熒光膜滲透性弱堿性。很可能這些堿有，因?yàn)橘|(zhì)子的酸性區(qū)室的親和力。 LysoTrackers也以不同的顏色（S表1）可用。
一個(gè)可比較艙溶酶體是像釀酒酵母真菌液泡。此膜的封閉空間是酸性性質(zhì)也?？梢暬跓晒怙@微鏡中的一種方法是使用苯乙烯基染料等調(diào)頻4-64?或FM5-95?。
當(dāng)涉及到蛋白分泌實(shí)驗(yàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）是一種特殊的興趣。一個(gè)經(jīng)典的染料來(lái)染色這個(gè)車(chē)廂是DiOC6（3）。它有一個(gè)偏好的急診室，但仍綁定到其他膜像線粒體。另一種方法特異性染色質(zhì)網(wǎng)是用ER-跟蹤器一樣ER-跟蹤綠色和紅色。兩者都是它們與格列本脲腎上腺素類(lèi)染料 - 一個(gè)sulfonylurease - 它結(jié)合到ATP敏感性鉀通道的完全駐留在ER膜。 BODIPY（硼 - 二吡咯亞甲基）描述了一組相對(duì)pH值不敏感的染料幾乎都是水不溶性的。這并沒(méi)有使他們的蛋白質(zhì)標(biāo)記，但脂質(zhì)和膜標(biāo)簽的一個(gè)很好的工具。
相鄰的車(chē)廂內(nèi)質(zhì)網(wǎng) - 高爾基appararatus - 可以用熒光神經(jīng)酰胺類(lèi)似物如NBD C6-神經(jīng)酰胺和BODIPY FL C5-神經(jīng)酰胺。神經(jīng)酰胺是鞘脂的高度富集于高爾基體。
隨著進(jìn)一步基于脂質(zhì)染料的幫助有可能弄臟特殊膜區(qū)域樣脂質(zhì)筏。這些富含膽固醇的結(jié)構(gòu)域可以通過(guò)使用NBD-6膽固醇或NBP-12膽固醇除其他（Avanti極性脂質(zhì)）被可視化。
除了使用特殊的非proteinacous熒光染料標(biāo)記的細(xì)胞區(qū)室，也可以染色的與蛋白質(zhì)的幫助下與偏好在小區(qū)的不同位置感興趣的區(qū)域。這些蛋白質(zhì)可以被鏈接到的熒光染料和可視化的熒光顯微鏡。一個(gè)示例為這樣一種方法是麥胚凝集素（WGA）的用法，其特異性地結(jié)合于唾液酸和N-乙酰葡糖氨基存在于質(zhì)膜上。 WGA被耦合到熒光染料。與之質(zhì)膜可以被觀察到。
離子成像
在神經(jīng)元的研究中，基因的活性或細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的情況下 - 例如 - 它是感興趣了解的細(xì)胞中的離子濃度。鈉，鈣，氯離子或鎂離子具有在許多不同的細(xì)胞事件的深刻影響。通常，離子可被捕獲與熒光標(biāo)記的螯合劑，當(dāng)綁定到適當(dāng)?shù)碾x子而改變它們的光譜性質(zhì)的幫助。這個(gè)原理體現(xiàn)在鈣指標(biāo)呋喃-2，吲-1，熒光 - 3，熒光4和鈣綠，例如。
鈉檢測(cè)，SBFI（鈉結(jié)合benzofurzanisophthalate）或綠色鈉是常用的。 PBFI（鉀結(jié)合苯并呋喃間苯二甲酸）檢測(cè)鉀離子。
有趣的是也有基于蛋白質(zhì)的鈣指標(biāo)。其中之一是基于化學(xué)發(fā)光的水母蛋白水母發(fā)光蛋白。水母發(fā)光蛋白的發(fā)光團(tuán)腔腸素，分子氧和Ca2 +的相互作用導(dǎo)致了藍(lán)色的光的釋放 - 在熒光蛋白的發(fā)現(xiàn)非常突出的機(jī)構(gòu)。
熒光染料和它們的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的峰
所有上面提到的染料列于下表中。另外附加的熒光染料，其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)峰相提并論。
Table 1
熒光染料樣品 | 激發(fā) | 發(fā)射 |
Indo-1, Ca saturated | 331 nm | 404 nm |
Indo-1 Ca2+ | 346 nm | 404 nm |
Cascade Blue BSA pH 7.0 | 401 nm | 419 nm |
Cascade Blue | 398 nm | 420 nm |
LysoTracker Blue | 373 nm | 421 nm |
Alexa 405 | 401 nm | 421 nm |
LysoSensor Blue pH 5.0 | 374 nm | 424 nm |
LysoSensor Blue | 374 nm | 424 nm |
DyLight 405 | 399 nm | 434 nm |
DyLight 350 | 332 nm | 435 nm |
BFP (Blue Fluorescent Protein) | 380 nm | 439 nm |
Alexa 350 | 343 nm | 441 nm |
7-Amino-4-methylcoumarin pH 7.0 | 346 nm | 442 nm |
Amino Coumarin | 345 nm | 442 nm |
AMCA conjugate | 347 nm | 444 nm |
Coumarin | 360 nm | 447 nm |
7-Hydroxy-4-methylcoumarin | 360 nm | 447 nm |
7-Hydroxy-4-methylcoumarin pH 9.0 | 361 nm | 448 nm |
6,8-Difluoro-7-hydroxy-4-methylcoumarin pH 9.0 | 358 nm | 450 nm |
Hoechst 33342 | 352 nm | 455 nm |
Pacific Blue | 404 nm | 455 nm |
Hoechst 33258 | 352 nm | 455 nm |
Hoechst 33258-DNA | 352 nm | 455 nm |
Pacific Blue antibody conjugate pH 8.0 | 404 nm | 455 nm |
PO-PRO-1 | 434 nm | 457 nm |
PO-PRO-1-DNA | 435 nm | 457 nm |
POPO-1 | 433 nm | 457 nm |
POPO-1-DNA | 433 nm | 458 nm |
DAPI-DNA | 359 nm | 461 nm |
DAPI | 358 nm | 463 nm |
Marina Blue | 362 nm | 464 nm |
SYTOX Blue-DNA | 445 nm | 470 nm |
CFP (Cyan Fluorescent Protein) | 434 nm | 474 nm |
eCFP (Enhanced Cyan Fluorescent Protein) | 437 nm | 476 nm |
1-Anilinonaphthalene-8-sulfonic acid (1,8-ANS) | 375 nm | 479 nm |
Indo-1, Ca free | 346 nm | 479 nm |
1,8-ANS (1-Anilinonaphthalene-8-sulfonic acid) | 375 nm | 480 nm |
BO-PRO-1-DNA | 462 nm | 482 nm |
BOPRO-1 | 462 nm | 482 nm |
BOBO-1-DNA | 461 nm | 484 nm |
SYTO 45-DNA | 451 nm | 486 nm |
evoglow-Pp1 | 448 nm | 495 nm |
evoglow-Bs1 | 448 nm | 496 nm |
evoglow-Bs2 | 448 nm | 496 nm |
Auramine O | 431 nm | 501 nm |
DiO | 487 nm | 501 nm |
LysoSensor Green pH 5.0 | 447 nm | 502 nm |
Cy 2 | 489 nm | 503 nm |
LysoSensor Green | 447 nm | 504 nm |
Fura-2, high Ca | 336 nm | 504 nm |
Fura-2 Ca2+sup> | 336 nm | 505 nm |
SYTO 13-DNA | 488 nm | 506 nm |
YO-PRO-1-DNA | 491 nm | 507 nm |
YOYO-1-DNA | 491 nm | 509 nm |
eGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein) | 488 nm | 509 nm |
LysoTracker Green | 503 nm | 509 nm |
GFP (S65T) | 489 nm | 509 nm |
BODIPY FL, MeOH | 502 nm | 511 nm |
Sapphire | 396 nm | 511 nm |
BODIPY FL conjugate | 503 nm | 512 nm |
MitoTracker Green | 490 nm | 512 nm |
MitoTracker Green FM, MeOH | 490 nm | 512 nm |
Fluorescein 0.1 M NaOH | 493 nm | 513 nm |
Calcein pH 9.0 | 494 nm | 514 nm |
Fluorescein pH 9.0 | 490 nm | 514 nm |
Calcein | 493 nm | 514 nm |
Fura-2, no Ca | 367 nm | 515 nm |
Fluo-4 | 494 nm | 516 nm |
FDA | 495 nm | 517 nm |
DTAF | 495 nm | 517 nm |
Fluorescein | 495 nm | 517 nm |
Fluorescein antibody conjugate pH 8.0 | 493 nm | 517 nm |
CFDA | 495 nm | 517 nm |
FITC | 495 nm | 517 nm |
Alexa Fluor 488 hydrazide-water | 493 nm | 518 nm |
DyLight 488 | 493 nm | 518 nm |
5-FAM pH 9.0 | 492 nm | 518 nm |
FITC antibody conjugate pH 8.0 | 495 nm | 519 nm |
Alexa 488 | 493 nm | 520 nm |
Rhodamine 110 | 497 nm | 520 nm |
Rhodamine 110 pH 7.0 | 497 nm | 520 nm |
Acridine Orange | 431 nm | 520 nm |
Alexa Fluor 488 antibody conjugate pH 8.0 | 499 nm | 520 nm |
BCECF pH 5.5 | 485 nm | 521 nm |
PicoGreendsDNA quantitation reagent | 502 nm | 522 nm |
SYBR Green I | 498 nm | 522 nm |
Rhodaminen Green pH 7.0 | 497 nm | 523 nm |
CyQUANT GR-DNA | 502 nm | 523 nm |
NeuroTrace 500/525, green fluorescent Nissl stain-RNA | 497 nm | 524 nm |
DansylCadaverine | 335 nm | 524 nm |
Rhodol Green antibody conjugate pH 8.0 | 499 nm | 524 nm |
Fluoro-Emerald | 495 nm | 524 nm |
Nissl | 497 nm | 524 nm |
Fluorescein dextran pH 8.0 | 501 nm | 524 nm |
Rhodamine Green | 497 nm | 524 nm |
5-(and-6)-Carboxy-2', 7'-dichlorofluorescein pH 9.0 | 504 nm | 525 nm |
DansylCadaverine, MeOH | 335 nm | 526 nm |
eYFP (Enhanced Yellow Fluorescent Protein) | 514 nm | 526 nm |
Oregon Green 488 | 498 nm | 526 nm |
Oregon Green 488 antibody conjugate pH 8.0 | 498 nm | 526 nm |
Fluo-3 | 506 nm | 527 nm |
BCECF pH 9.0 | 501 nm | 527 nm |
SBFI-Na+ | 336 nm | 527 nm |
Fluo-3 Ca2+ | 506 nm | 527 nm |
Rhodamine 123, MeOH | 507 nm | 529 nm |
FlAsH | 509 nm | 529 nm |
Calcium Green-1 Ca2+ | 506 nm | 529 nm |
Magnesium Green | 507 nm | 530 nm |
DM-NERF pH 4.0 | 493 nm | 530 nm |
Calcium Green | 506 nm | 530 nm |
Citrine | 515 nm | 530 nm |
LysoSensor Yellow pH 9.0 | 335 nm | 530 nm |
TO-PRO-1-DNA | 515 nm | 531 nm |
Magnesium Green Mg2+ | 507 nm | 531 nm |
Sodium Green Na+ | 507 nm | 531 nm |
TOTO-1-DNA | 514 nm | 531 nm |
Oregon Green 514 | 512 nm | 532 nm |
Oregon Green 514 antibody conjugate pH 8.0 | 513 nm | 533 nm |
NBD-X | 466 nm | 534 nm |
DM-NERF pH 7.0 | 509 nm | 537 nm |
NBD-X, MeOH | 467 nm | 538 nm |
CI-NERF pH 6.0 | 513 nm | 538 nm |
Alexa 430 | 431 nm | 540 nm |
Alexa Fluor 430 antibody conjugate pH 7.2 | 431 nm | 540 nm |
CI-NERF pH 2.5 | 504 nm | 541 nm |
Lucifer Yellow, CH | 428 nm | 542 nm |
LysoSensor Yellow pH 3.0 | 389 nm | 542 nm |
6-TET, SE pH 9.0 | 521 nm | 542 nm |
Eosin antibody conjugate pH 8.0 | 525 nm | 546 nm |
Eosin | 524 nm | 546 nm |
6-Carboxyrhodamine 6G pH 7.0 | 526 nm | 547 nm |
6-Carboxyrhodamine 6G, hydrochloride | 525 nm | 547 nm |
Bodipy R6G SE | 528 nm | 547 nm |
BODIPY R6G, MeOH | 528 nm | 547 nm |
6 JOE | 520 nm | 548 nm |
Cascade Yellow antibody conjugate pH 8.0 | 399 nm | 549 nm |
Cascade Yellow | 399 nm | 549 nm |
mBanana | 540 nm | 553 nm |
Alexa Fluor 532 antibody conjugate pH 7.2 | 528 nm | 553 nm |
Alexa 532 | 528 nm | 553 nm |
Erythrosin-5-isothiocyanate pH 9.0 | 533 nm | 554 nm |
6-HEX, SE pH 9.0 | 534 nm | 559 nm |
mOrange | 548 nm | 562 nm |
mHoneydew | 478 nm | 562 nm |
Cy 3 | 549 nm | 562 nm |
Rhodamine B | 543 nm | 565 nm |
DiI | 551 nm | 565 nm |
5-TAMRA-MeOH | 543 nm | 567 nm |
Alexa 555 | 553 nm | 568 nm |
Alexa Fluor 555 antibody conjugate pH 7.2 | 553 nm | 568 nm |
DyLight 549 | 555 nm | 569 nm |
BODIPY TMR-X, SE | 544 nm | 570 nm |
BODIPY TMR-X, MeOH | 544 nm | 570 nm |
PO-PRO-3-DNA | 539 nm | 571 nm |
PO-PRO-3 | 539 nm | 571 nm |
Rhodamine | 551 nm | 573 nm |
Bodipy TMR-X conjugate | 544 nm | 573 nm |
POPO-3 | 533 nm | 573 nm |
Alexa 546 | 562 nm | 573 nm |
BODIPY TMR-X antibody conjugate pH 7.2 | 544 nm | 573 nm |
Calcium Orange Ca2+ | 549 nm | 573 nm |
TRITC | 550 nm | 573 nm |
Calcium Orange | 549 nm | 574 nm |
Rhodaminephalloidin pH 7.0 | 558 nm | 575 nm |
MitoTracker Orange | 551 nm | 575 nm |
MitoTracker Orange, MeOH | 551 nm | 575 nm |
Phycoerythrin | 565 nm | 575 nm |
Magnesium Orange | 550 nm | 575 nm |
R-Phycoerythrin pH 7.5 | 565 nm | 576 nm |
5-TAMRA pH 7.0 | 553 nm | 576 nm |
5-TAMRA | 549 nm | 577 nm |
Rhod-2 | 552 nm | 577 nm |
FM 1-43 | 472 nm | 578 nm |
Rhod-2 Ca2+ | 553 nm | 578 nm |
Tetramethylrhodamine antibody conjugate pH 8.0 | 552 nm | 578 nm |
FM 1-43 lipid | 473 nm | 579 nm |
LOLO-1-DNA | 568 nm | 580 nm |
dTomato | 554 nm | 581 nm |
DsRed | 563 nm | 581 nm |
Dapoxyl (2-aminoethyl) sulfonamide | 372 nm | 582 nm |
Tetramethylrhodamine dextran pH 7.0 | 555 nm | 582 nm |
Fluor-Ruby | 554 nm | 582 nm |
Resorufin | 571 nm | 584 nm |
Resorufin pH 9.0 | 571 nm | 584 nm |
mTangerine | 568 nm | 585 nm |
LysoTracker Red | 578 nm | 589 nm |
Lissaminerhodamine | 572 nm | 590 nm |
Cy 3.5 | 578 nm | 591 nm |
Rhodamine Red-X antibody conjugate pH 8.0 | 573 nm | 591 nm |
Sulforhodamine 101, EtOH | 578 nm | 593 nm |
JC-1 pH 8.2 | 593 nm | 595 nm |
JC-1 | 592 nm | 595 nm |
mStrawberry | 575 nm | 596 nm |
MitoTracker Red | 578 nm | 599 nm |
MitoTracker Red, MeOH | 578 nm | 599 nm |
X-Rhod-1 Ca2+ | 580 nm | 602 nm |
Alexa Fluor 568 antibody conjugate pH 7.2 | 579 nm | 603 nm |
Alexa 568 | 576 nm | 603 nm |
5-ROX pH 7.0 | 578 nm | 604 nm |
5-ROX (5-Carboxy-X-rhodamine, triethylammonium salt) | 578 nm | 604 nm |
BO-PRO-3-DNA | 574 nm | 604 nm |
BOPRO-3 | 574 nm | 604 nm |
BOBO-3-DNA | 570 nm | 605 nm |
Ethidium Bromide | 524 nm | 605 nm |
ReAsH | 597 nm | 608 nm |
Calcium Crimson | 589 nm | 608 nm |
Calcium Crimson Ca2+ | 590 nm | 608 nm |
mRFP | 585 nm | 608 nm |
mCherry | 587 nm | 610 nm |
Texas Red-X antibody conjugate pH 7.2 | 596 nm | 613 nm |
HcRed | 590 nm | 614 nm |
DyLight 594 | 592 nm | 616 nm |
Ethidium homodimer-1-DNA | 528 nm | 617 nm |
Ethidiumhomodimer | 528 nm | 617 nm |
Propidium Iodide | 538 nm | 617 nm |
SYPRO Ruby | 467 nm | 618 nm |
Propidium Iodide-DNA | 538 nm | 619 nm |
Alexa 594 | 590 nm | 619 nm |
BODIPY TR-X, SE | 588 nm | 621 nm |
BODIPY TR-X, MeOH | 588 nm | 621 nm |
BODIPY TR-X phallacidin pH 7.0 | 590 nm | 621 nm |
Alexa Fluor 610 R-phycoerythrin streptavidin pH 7.2 | 567 nm | 627 nm |
YO-PRO-3-DNA | 613 nm | 629 nm |
Di-8 ANEPPS | 469 nm | 630 nm |
Di-8-ANEPPS-lipid | 469 nm | 631 nm |
YOYO-3-DNA | 612 nm | 631 nm |
Nile Red-lipid | 553 nm | 636 nm |
Nile Red | 559 nm | 637 nm |
DyLight 633 | 624 nm | 646 nm |
mPlum | 587 nm | 649 nm |
TO-PRO-3-DNA | 642 nm | 657 nm |
DDAO pH 9.0 | 648 nm | 657 nm |
Fura Red, high Ca | 434 nm | 659 nm |
Allophycocyanin pH 7.5 | 651 nm | 660 nm |
APC (allophycocyanin) | 650 nm | 660 nm |
Nile Blue, EtOH | 631 nm | 660 nm |
TOTO-3-DNA | 642 nm | 661 nm |
Cy 5 | 646 nm | 664 nm |
BODIPY 650/665-X, MeOH | 646 nm | 664 nm |
Alexa Fluor 647 R-phycoerythrin streptavidin pH 7.2 | 569 nm | 666 nm |
DyLight 649 | 652 nm | 668 nm |
Alexa Fluor 647 antibody conjugate pH 7.2 | 653 nm | 668 nm |
Alexa 647 | 653 nm | 669 nm |
Fura Red Ca2+ | 435 nm | 670 nm |
Atto 647 | 644 nm | 670 nm |
Fura Red, low Ca | 472 nm | 673 nm |
Carboxynaphthofluorescein pH 10.0 | 600 nm | 674 nm |
Alexa 660 | 664 nm | 691 nm |
Alexa Fluor 660 antibody conjugate pH 7.2 | 663 nm | 691 nm |
Cy 5.5 | 673 nm | 692 nm |
Alexa Fluor 680 antibody conjugate pH 7.2 | 679 nm | 702 nm |
Alexa 680 | 679 nm | 703 nm |
DyLight 680 | 678 nm | 706 nm |
Alexa Fluor 700 antibody conjugate pH 7.2 | 696 nm | 719 nm |
Alexa 700 | 696 nm | 720 nm |
FM 4-64, 2% CHAPS | 506 nm | 751 nm |
FM 4-64 | 508 nm | 751 nm |