奧林巴斯顯微鏡熒光探針的分類和應(yīng)用

2020-09-03 14:27:52

 一般情況下,根據(jù)其勵磁和排放特性,以及它們的化學(xué)和生物特性的熒光探針進(jìn)行分類。以下表格評論中的每個重要的生物類探針的例子。

蛋白質(zhì)、 核酸、 糖類、 脂類和毒素

 

  • 受體激動劑/拮抗劑: TRITC 標(biāo)記金環(huán)蛇-受體的分布可以觀察到在神經(jīng)肌肉接頭時金環(huán)蛇專門與乙酰膽堿受體結(jié)合。

  • 奧林巴斯顯微鏡
  • 抗體: FITC 標(biāo)記的抗鼠 IgG (或 IgG 和 IgM) 抗體-選定 (二級抗體) 抗抗體 IgG、 IgM (原發(fā)性抗體) 從各種動物用熒光染料標(biāo)記。

  • 親和素: 德克薩斯紅色標(biāo)記鏈霉親和 (或抗生物素蛋白)-這種探頭可以用于檢測生物素標(biāo)記的魚探針或抗體,因為抗生物素蛋白可以綁定具體與生物素。

  • 葡聚糖: 德克薩斯紅標(biāo)葡聚糖-葡聚糖、 多糖 3,000 對 70000 的高分子量用熒光染料或探針 (例如,鈣離子探針、 pH 探頭或熒光素) 標(biāo)記。標(biāo)記的多糖是注入到一個單元格,然后均勻地分布在細(xì)胞質(zhì)中。

  • 血脂: NBD 標(biāo)記卵磷脂-與膜脂質(zhì)膜流動性,測量手段光漂白技術(shù) (主要光漂白、 FRAP后恢復(fù)),并觀察的膜融合過程混合血脂用熒光探針標(biāo)記。

  • 核苷酸: Cy3 標(biāo)記筒樁-用于在標(biāo)簽的熒光原位雜交技術(shù) (探頭 (通過尼克翻譯)。尼克翻譯是一種技術(shù)的標(biāo)簽魚探針的 DNA 片段。試劑通常由制造商提供的套件的形式。DNA 降解酶 (頭 1) 隨機刻痕,在主反應(yīng)中,兩個 DNA 鏈之一和第二個酶 (DNA 聚合酶 1) 消化來自尼克的 DNA,同時在消化部分合成 DNA。一片廣闊的新合成的 DNA 含有熒光染料標(biāo)記的核苷酸。可代替熒光染料標(biāo)記核苷酸的生物素核苷酸 (生物素-16-末端) 或*********核苷酸 (dioxigenin-11-末端)。

  • Phallotoxin: 羅丹明鬼筆-成捆的肌動蛋白微絲 (應(yīng)力纖維) 可以觀察在細(xì)胞中,因為熒光標(biāo)記的鬼筆和 phallacidin 可以綁定具體與肌動蛋白微絲 (微絲)。

脂質(zhì)膜的染色

 

  • 膜電位明智探頭: WW 781、 RH-155 和 Di-8-ANEPPS-這些染料被納入細(xì)胞膜。他們吸收或熒光強度隨膜電位。應(yīng)使用快速類型染料的反應(yīng)率約為毫秒為單位)。

  • 細(xì)胞器膜特異性探針: DiOC6(3),NBD 神經(jīng)酰胺,羅丹明 123-這些染料染色專門的細(xì)胞器膜、 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、 高爾基體細(xì)胞膜、 線粒體膜等。

  • 示蹤探頭: DiI、 DIO、 DIA-這些染料被納入細(xì)胞膜和觀察的神經(jīng)延長使用。

染色的細(xì)胞質(zhì)

 

  • 離子濃度明智染料: Fura 2、 印 1、 熒光 3,BCDCF 和竊用-1-膜滲透乙酰氧甲基酯的探針很容易引入活細(xì)胞。其熒光強度和勵磁/熒光光譜有所不同 (例如,鈣離子和 ph 值) 的細(xì)胞內(nèi)離子濃度。

  • 示蹤染料: 磺基羅丹明 101 和路西法黃色 CH-這些水溶性染料是微注入的神經(jīng)細(xì)胞的擴展觀察的單元格中。

  • 活細(xì)胞進(jìn)行了探討: 鈣黃綠素 AM 和 CFDA (羧基熒光素二乙酸酯)-細(xì)胞中酯酶轉(zhuǎn)膜滲透入膜防滲的染料,染料從而捕獲它們在細(xì)胞內(nèi)。

  • 核酸染色: DAPI,碘化丙啶,赫斯特?zé)晒馊玖?33342,溜溜球 1

  • 這些染料與核酸 (DNA、 RNA) 的細(xì)胞內(nèi)綁定,并成為熒光。他們都用來觀察細(xì)胞核和染色體的形態(tài),確定 DNA 數(shù)量。

  • 熒光蛋白: GFP (綠色熒光蛋白和衍生品)

  • 這種蛋白*初從水母中分離并發(fā)出藍(lán)色光激勵下的綠色熒光。綠色熒光蛋白基因已被孤立和改善,以獲得不同顏色的變種。

  • 熒光酶底物:Dihydrorhodamine 123

  • 酶的活性可以測量顯微鏡熒光染料隨著由特定酶在細(xì)胞中。

  • 熒光乳膠:FluoSpheres (分子探針)

  • 聚苯乙烯珠有直徑在 0.01 和 15 微米之間用于在觀測中的運輸在軸突,吞噬作用和測量的血液流動,或作為標(biāo)準(zhǔn)的研究確定在熒光顯微鏡的分辨率和顯微鏡性能。