奧林巴斯顯微鏡斜照明折光指數(shù)測(cè)定

 斜照明有時(shí)用作貝克線測(cè)試以確定是否高于或低于周圍的介質(zhì)折射率的一個(gè)標(biāo)本的替代方法。本互動(dòng)教程將探討如何標(biāo)本和其周圍介質(zhì)的折射率的變化改變?cè)陲@微鏡下可見性時(shí)利用斜照明技術(shù)。

本教程使用初始化一個(gè)標(biāo)本的折射率的 1.15 定位在周圍的介質(zhì)中的折射率 1.33 （代表水或輕輕地緩沖鹽水溶液），和被照亮的離軸光線來自左下方的教程窗口。為了運(yùn)行本教程中，移動(dòng)的標(biāo)本（折射率值） 滑塊值為 1.0 和 1.5 之間。從右到左移動(dòng)滑塊時(shí)，試樣的外觀被改變?cè)?strong len="13">目鏡視圖窗口中。要改變周圍介質(zhì)的折射率，環(huán)繞（折射率值） 滑塊移動(dòng)向右或向左 （此滑塊也有一系列的折射指數(shù) 1.0 和 1.5 之間）。翻譯環(huán)繞滑塊也會(huì)影響試樣的外觀和可見性，如下文所述。兩個(gè)滑塊的互動(dòng)和一個(gè)滑塊的定位會(huì)影響到的其他的運(yùn)動(dòng)范圍。

在試樣較低折射率的介質(zhì)中的裝載位置的情況下，底紋從 anaxial 照明，結(jié)果將出現(xiàn)在方相反的光進(jìn)入標(biāo)本，反之亦然，如圖 1 所示。在圖 1 中給出了兩個(gè)圖表中，兩個(gè)同等大小斜光線都被描繪進(jìn)入通過周圍的介質(zhì)在同一入射角的標(biāo)本。A在左邊圖上，光傳播試樣面積較大，比在點(diǎn)B的點(diǎn)，這樣，附近的地區(qū)上的點(diǎn)A試樣將出現(xiàn)比在B點(diǎn)附近的區(qū)域更暗。在這些情況下試樣的一側(cè)會(huì)出現(xiàn)陰影或比另一側(cè)通過顯微鏡目鏡查看時(shí)有點(diǎn)暗 (點(diǎn)表示的A'和B'在圖 1 的左上部）。這是介質(zhì)的案例，當(dāng)樣品折射率大于周圍。

當(dāng)試樣具有較低的折射率比周圍的介質(zhì)時(shí)發(fā)生了相反的效果 （見圖 1 的右側(cè)）。在這種情況下，試樣的陰影或較暗一側(cè)將是最斜光部門停止的那一方。當(dāng)試樣和周圍介質(zhì)有完全相同的折射率時(shí)，標(biāo)本將是透明的 （或不可見的） 然后會(huì)有對(duì)斜照明沒有折射的影響。

該折射率測(cè)定技術(shù)的靈敏度是高度依賴于聚光鏡焦距，可變光闌的位置，和扇區(qū)的幾何停止（如果使用的話）。一般情況下，當(dāng)聚光鏡用心專注，甚至在照明領(lǐng)域內(nèi)的實(shí)現(xiàn)得到最好的結(jié)果。