奧林巴斯顯微鏡光學(xué)切片與相差和DIC

 一個微分干涉對比（DIC）顯微鏡*過相襯的主要優(yōu)點(diǎn)是，利用該儀器在充分的數(shù)值孔徑而不遭受相位板或冷凝器的環(huán)的掩蔽效應(yīng)，這嚴(yán)重限制了在冷凝器和目標(biāo)孔的尺寸的能力。 主要的好處是提高了軸向分辨率，特別是關(guān)于對DIC顯微鏡在大光圈大小，以產(chǎn)生良好的高清晰度圖像的能力。 這種互動式的教學(xué)探討和比較厚的樣品與DIC和相襯的光學(xué)切片，并揭示了無限制的光圈效應(yīng)的優(yōu)勢上取得良好定義的部分。

教程初始化與隨機(jī)選擇的樣品中出現(xiàn)的每一個試樣的圖像窗口的圖像。 左側(cè)窗口，標(biāo)題為DIC的標(biāo)本的圖像，包含具有一個微分干涉對比光學(xué)系統(tǒng)所捕獲的樣本的圖像，而當(dāng)在相位對比成像的右側(cè)窗口（ 相位對比試樣的圖像 ）顯示相同的試樣。 在雙窗口中顯示的顯微鏡焦平面是相同的每個標(biāo)本。 為了操作的教程，使用目的對焦滑塊來模擬通過各種軸向焦平面成像同時對標(biāo)本的影響。 當(dāng)滑塊被轉(zhuǎn)換到左側(cè)，上側(cè)焦平面變得可見，并移動滑塊向右揭示了低級焦平面。 一個新的標(biāo)本可以在任何時候通過使用選擇A試片下拉菜單列表中選擇。

因為相位對比圖像可以變得模糊（或什至遇到反轉(zhuǎn)對比度）時，試樣的光程長度的波動在大范圍內(nèi)，該技術(shù)應(yīng)僅限于試樣具有十分之一波長或更小的光程差，如前面所討論。 換句話說，厚的樣品，或那些具有楔形結(jié)構(gòu)，一般不適合用于定量調(diào)查與相差顯微鏡。 薄樣品也往往在微分干涉對比，以產(chǎn)生高質(zhì)量的圖像，但是在寬孔口采用光學(xué)切片技術(shù)更厚的試樣（具有十分之一和全波長之間的光程差）也可以成像。

在相襯照明孔徑是固定的聚光器環(huán)的尺寸，并且不能被改變以實(shí)現(xiàn)字段的增加或減少的深度。 這種限制阻礙了含顯著暈文物標(biāo)本的觀察，這有時晦澀的標(biāo)本集中的特點(diǎn)，由于重疊的細(xì)節(jié)強(qiáng)光始發(fā)始發(fā)的客觀焦平面以外。 經(jīng)常試圖圖像標(biāo)本太厚相襯時出現(xiàn)這樣的問題。 然而，如前面所討論的，微分干涉相襯顯微鏡的光學(xué)切片的能力（在寬冷凝器孔徑大?。┛蓪?shí)現(xiàn)出色的圖像，以與相對較厚的樣品獲得的。

從厚的樣品在差示干涉反差大孔徑的光學(xué)部分的好處是，如圖1所示，并與成像相襯相同viewfields。 圖1（b）示出從藪枝螅水螅成像在高放大倍率在DIC與冷凝器光圈開口設(shè)置為大約95％的目標(biāo)孔徑大小的生殖息肉一個水母芽。 由此產(chǎn)生的*薄光學(xué)部分揭示了水母的特點(diǎn)，這只是*低限度的光始發(fā)離焦平面遮住重點(diǎn)突出圖像細(xì)節(jié)。 當(dāng)相同的視場進(jìn)行檢查在相襯（圖1（a））時，水母圖像由光暈和表現(xiàn)出降低的分辨率，由于光學(xué)系統(tǒng)的孔徑限制的模糊。

類似的情況是通過1列于圖1（C）（f）條。 圖1（c）描繪了從帝王蝶（ 斑蝶屬條紋 ），在北美地區(qū)*常見的蝴蝶1重疊的翅膀上的鱗片。 個人尺度是因為暈文物和模糊的功能，是不是在焦點(diǎn)平面的沒有區(qū)別，如圖1（c）所示。 在一般情況下，圖像是由許多工件相混淆，使得試樣的特性難以破譯。 在成像微分干涉對比同一標(biāo)本（圖1（d））消除了許多分散注意力的文物位置遠(yuǎn)離焦平面，并明確界定在一個單一的翅膀鱗片的表面特征。 同樣，犬絳蟲黃瓜（ 犬復(fù)孔絳蟲蟲 ）的腹部內(nèi)的蛋包揭示了周圍個別雞蛋時，在DIC（圖1（f）項）成像銳利的邊緣。 然而，集中雞蛋是缺乏**結(jié)構(gòu)的相位對比（圖1（e）），主要是由于從其他雞蛋暈位于遠(yuǎn)離焦平面。

在大型冷凝器孔徑尺寸和高數(shù)值孔徑微分干涉對比光學(xué)切片功能對于單一成像焦平面厚厚的階段標(biāo)本的關(guān)鍵。 從特征躺在眼前焦平面之外細(xì)節(jié)和雜散光不包含DIC圖像以相同的方式作為相位對比圖像，這往往是由鹵素工件復(fù)雜。 因此，微分干涉對比可以采用稍微不利條件下（非常厚的樣品）下得到良好的圖像，即使在大景深呈現(xiàn)在相差顯微鏡相結(jié)構(gòu)是不可能的識別由于重疊的細(xì)節(jié)。