徠卡顯微鏡在小鼠犁鼻急性組織切片制備成像遙感信息素

2020-09-03 14:40:14

 彼得卡爾森和馬丁Lüscher的所使用的術(shù)語(yǔ)的信息素首次在1959年描述用于種內(nèi)通訊的化學(xué)物質(zhì)。 信息素是易失性或非易失性的短壽命的分子分泌的和/或包含在生物體液,如尿,已知為外激素的主要來(lái)源是液體。費(fèi)洛蒙通信牽連的各種關(guān)鍵的動(dòng)物模式,如親屬關(guān)系,階層organisations3和性的相互作用,并因此直接與給定物種的生存相關(guān)。 在小鼠中,以檢測(cè)信息素的能力通過犁鼻器(VNO),位于鼻腔的堿基配對(duì)的結(jié)構(gòu),主要介導(dǎo),并封閉在軟骨質(zhì)膠囊中。 每個(gè)VNO具有管狀的形狀,其管腔允許與外部世界的化學(xué)接觸。 感官神經(jīng)上皮主要由犁鼻器雙極感覺神經(jīng)元(的VSN)的。 每個(gè)VSN延伸的單個(gè)枝晶在一個(gè)大的樹突狀旋鈕軸承高達(dá)100微絨毛牽連化學(xué)檢測(cè)終了的內(nèi)腔。 無(wú)數(shù)的VSN亞群存在。 他們是由他們表達(dá),從而可能通過配體(S),他們認(rèn)識(shí)到化學(xué)感受器分化。 兩個(gè)主要的犁鼻器受體家族,V1R相和V2R中,是由240和120個(gè)成員分別由和表示在神經(jīng)上皮不同的層次。 嗅覺受體(OR)和甲酰肽受體(FPR中)也表達(dá)的VSN。

不論這些神經(jīng)元亞群的使用相同的下游信號(hào)通路,用于檢測(cè)信息素是未知的。 盡管鈣滲透性通道(TRPC2)目前在成熟神經(jīng)元的微絨毛發(fā)揮了重要作用TRPC2獨(dú)立的轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑提出了建議。 由于高數(shù)目的神經(jīng)元亞群和器官的特有形態(tài)中,存在于VNO信令元素的藥理學(xué)和生理學(xué)研究是復(fù)雜的。

在這里,我們提出了一個(gè)尖銳組織切片制備鼠標(biāo)VNO的執(zhí)行鈣成像調(diào)查。 這種生理方法允許觀察,在生物體組織預(yù)先裝入的Fura-2AM,鈣染料的VSN的一般或個(gè)別亞群,自然環(huán)境。 這種方法也便于學(xué)習(xí)任何GFP標(biāo)記信息素受體和能適合使用其它熒光鈣探針。 作為一個(gè)例子,我們?cè)谶@里使用一個(gè)VG鼠標(biāo)線,其中的信息素V1rb2受體的翻譯是由一個(gè)多順反子策略鏈接到綠色熒光蛋白的表達(dá)。

奧林巴斯顯微鏡

圖片:切口從BrechbühlJ等:成像遙感信息素在小鼠犁鼻急性組織切片制備


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