奧林巴斯顯微鏡透射光科勒照明
透射光顯微鏡科勒照明的調(diào)整是應(yīng)該實(shí)行，直至顯微鏡的所有嚴(yán)肅的學(xué)生掌握了邏輯和相對容易的過程。 在顯微鏡被接通每次，應(yīng)該仔細(xì)檢查，以確保所有的光學(xué)元件的正確對準(zhǔn)，并保證在燈的中心與所述聚光鏡和視場光闌被正確調(diào)整為科勒照明。
在圖1所示的顯微鏡采用了*的外部光源提供照明的顯微鏡。 燈殼體包含一個視場光闌和聚光透鏡，除了鎢 - 鹵素?zé)襞荨?/span> 一個單獨(dú)的電壓調(diào)節(jié)器提供可調(diào)節(jié)的直流電壓源，該5和12伏之間變化的燈。 現(xiàn)代顯微鏡通常包含內(nèi)置到顯微鏡的基礎(chǔ)上，沿與會聚透鏡和視場光闌的光源。 顯微鏡用內(nèi)部或外部光源科勒照明調(diào)整在理論上是相似的，但也有在下面將要描述的過程的某些差異。
在顯微鏡下，無論是對于克勒Nelsonian，或任何其它策略用于照明的對準(zhǔn)的一個重要步驟，是在光源（通常是鎢 - 鹵素?zé)襞荩┑膶?zhǔn)。 許多現(xiàn)代顯微鏡現(xiàn)在有預(yù)中心和預(yù)聚焦燈，但是老款車型仍然需要光源為中心，重點(diǎn)用戶。 我們建議您咨詢的車主手冊中的說明有關(guān)如何燈為中心，并為其他有關(guān)照明光源的重要信息。 下面的程序建議對齊外部和內(nèi)部的燈：
內(nèi)部鹵鎢燈
后在顯微鏡上，完全打開兩個視場光闌（通常接近顯微鏡的光端口）和聚光鏡孔徑光闌（由套環(huán)控制或處理上的聚光器殼體）的燈開關(guān)。
有些廠家為擴(kuò)散光從燈泡發(fā)出提供一個磨砂玻璃過濾器。 這個過濾器通常位于鄰近所述燈殼在那里它被安裝在顯微鏡的主體中的過濾器保持器。 在進(jìn)行燈對準(zhǔn)前除去此過濾條件。
放置一個片的白紙，磨砂玻璃，劍擦拭，或鏡頭清潔紙顯微鏡端口和燈絲的圖像將如圖2清晰可見。
使用在燈殼體上的調(diào)節(jié)螺釘旋轉(zhuǎn)燈（因此，長絲）在其保持器也進(jìn)行移動前后或上下移動。 我們已經(jīng)構(gòu)建了一個互動的Java教程的評論燈絲定位的基礎(chǔ)知識。 正確地操縱燈殼體調(diào)整的組合應(yīng)確保燈絲是集中在光路徑和聚焦的聚光鏡的孔徑光闌。
圖3示出了當(dāng)燈絲采用上面描述的程序是可見的顯微鏡光端口的典型視圖。 在左側(cè)圖3中的端口（a）包含細(xì)絲是嚴(yán)重失準(zhǔn)和位置不正確聚焦，將完全填充孔徑光闌物鏡的，也不是后焦平面的圖像。 使用在燈殼體平移調(diào)整，燈絲被聚焦（圖3（b）），然后將光口內(nèi)的中心（圖3（c））。 游客和學(xué)生可以練習(xí)使用對準(zhǔn)下面的交互式Java教程“虛擬”燈絲：
外部鎢及鎢鹵素?zé)襞?/strong>
大多數(shù)外部光源是老年人和沒有預(yù)先為中心的燈泡。 在定心外部鎢 - 鹵素?zé)舻?個步驟是預(yù)測燈絲的圖象復(fù)印在一個遙遠(yuǎn)的片材，由一本書或壁支承。 使用調(diào)整螺釘或旋鈕繞其自身軸線的長絲，并確保它被聚光透鏡和視場光闌，它們是外部照明源的一個組成部分的光軸的中心。
放置在外部照射約7-10英寸的距離反射鏡位于該顯微鏡的基座直接下方的聚光器上（參見圖1）。許多關(guān)于設(shè)計用于外部光源的顯微鏡鏡是平凹并具有一個平面（平面）和一個凹邊。 肯定的是，光源是從所述反射鏡的平坦表面使用外部鎢鹵素光源時反射。
燈絲應(yīng)在鏡子為中心，如圖所示4。 這可以以類似于內(nèi)部燈的方式通過將一塊紙巾在鏡子和可視化，其中長絲圖像投影進(jìn)行檢查。 進(jìn)行任何必要的調(diào)整，以使外部照明與顯微鏡的光學(xué)軸線。 定心燈絲后，反射鏡的位置應(yīng)以投影反射到聚光器。 通過將一塊紙巾在載物臺開幕檢查。 燈絲應(yīng)該是失焦，但在載物臺開口的中心方形框。
聚光鏡和視場光闌的對齊方式
旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器帶來10倍的物鏡入光路。 下一步，將標(biāo)本在顯微鏡載物臺上，并使用了粗，細(xì)調(diào)焦旋鈕聚焦顯微鏡。 這應(yīng)該是通過緩慢升高顯微鏡載物臺，同時觀看滑動，直到它非常接近完成（但不接觸?。┑奈镧R。 在這一點(diǎn)上，本階段將要稍微降低 ，使樣品聚焦。 這是，當(dāng)正確實(shí)施，將避免物鏡和標(biāo)本蓋玻片之間的沖突的一個重要概念。 看看通過目鏡觀察，慢慢地降低載物臺，用細(xì)調(diào)焦旋鈕，直到試片細(xì)節(jié)成為焦點(diǎn)。 試樣應(yīng)具備足夠的對比度，提供清晰，明快的圖像。 一個高度染色生物組織樣品是優(yōu)良的用于明場模式對準(zhǔn)顯微鏡，但光學(xué)雙折射的樣品也可用于當(dāng)在顯微鏡配備為偏振光或微分干涉對比。
雙目顯微鏡，調(diào)整眼管與您的瞳距一致。 單一的融合圖像應(yīng)通過兩只眼睛是不可見的頭部顯著運(yùn)動，觀看應(yīng)該是舒適。 如果只有一個人使用的顯微鏡，這種調(diào)整不應(yīng)該要經(jīng)常做。 許多望遠(yuǎn)鏡頭具有分級量表（圖5），對應(yīng)于瞳孔間距離的大小，使顯微鏡來快速調(diào)整眼管不查看通過它們（平均瞳孔間距為65毫米）。
在現(xiàn)代顯微鏡，眼管類似雙筒望遠(yuǎn)鏡的方式進(jìn)行調(diào)整。 然而，在許多老機(jī)型，眼管來回滑動在一個單一的平面，并調(diào)整它們可能涉及輕微改變顯微鏡鏡筒長度。 不管翻譯機(jī)制，管子應(yīng)該被定位在一個距離，該距離能舒適地觀看。 接著，旋轉(zhuǎn)包含畢業(yè)規(guī)則或顯微攝影，直到分劃板標(biāo)記出現(xiàn)在大家關(guān)注的焦點(diǎn)疊加在一個集中的標(biāo)本目鏡的眼球晶狀體。 如果沒有標(biāo)線存在，轉(zhuǎn)動眼球晶狀體，直到樣本的焦點(diǎn)。
屈光度調(diào)節(jié)應(yīng)單獨(dú)向目鏡。 一些顯微鏡對每個目鏡分級刻度，指示相對于所述目鏡的主體的眼透鏡的位置。 其它模型保持目鏡的身體在一個固定的位置牢固地固定在眼管子的銷和槽。 *步是要么排隊上裝備有這種標(biāo)記的目鏡分級標(biāo)記或轉(zhuǎn)動眼透鏡順時針*短焦距位置。 接著，集中樣品與10倍的物鏡，然后旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換直到下一個放大倍數(shù)的物鏡（通常為5倍）為試樣的上方。 在這一點(diǎn)上，單獨(dú)重新調(diào)整每只眼睛晶狀體（不使用顯微鏡粗或細(xì)的重點(diǎn)機(jī)制），直到試樣是在大家關(guān)注的焦點(diǎn)。 旋轉(zhuǎn)20倍物鏡移入光路和調(diào)整顯微鏡的微調(diào)旋鈕。 重復(fù)的眼睛屈光度調(diào)整鏡頭與5倍的物鏡（再次不擾民顯微鏡精細(xì)調(diào)焦機(jī)構(gòu)），并在顯微鏡應(yīng)調(diào)整到正確的屈光度設(shè)置。 這些設(shè)置會有所不同從用戶到用戶，所以記錄的眼透鏡的位置，如果目鏡有一個漸變的規(guī)?？焖俜祷氐竭m當(dāng)?shù)恼{(diào)整。
正確的屈光度調(diào)節(jié)允許在用戶的左眼和右眼的任何差額補(bǔ)償，使整個視場通過兩個目鏡出現(xiàn)在大家關(guān)注的焦點(diǎn)。 這也使顯微鏡通過在物鏡轉(zhuǎn)換器的所有不同的物鏡保持齊焦。 目鏡視度調(diào)節(jié)也可以彌補(bǔ)常見的視力問題，如遠(yuǎn)或近近視，允許用戶查看樣本沒有眼鏡。 然而，這些目鏡調(diào)整不會彌補(bǔ)散光，強(qiáng)迫用戶有眼睛缺陷檢查標(biāo)本時必須佩戴眼鏡。
接下來的一步是慢慢關(guān)閉視場光闌（調(diào)整可以是對外部燈殼體或在靠近光端口顯微鏡的基座）到它的*小設(shè)定值，直到只有一個模糊的輪廓示出了在視場（圖6（a ））。 臺下聚光器裝上（通常）控制的滾花旋鈕上下運(yùn)動相對于載物臺，一個機(jī)架上。 調(diào)整此旋鈕，直至視場光闌葉片是大家關(guān)注的焦點(diǎn)，對已經(jīng)為重點(diǎn)的試樣頂部，然后用聚光器螺絲，將視場光闌的圖像移動到視場中心（與光軸顯微鏡 - 圖6（b））。
當(dāng)提升或降低聚光鏡聚焦視場光闌葉片，所述彈性膜片的聚焦圖像可以具有圍繞該葉片紅色或藍(lán)色的暈。 這是由于缺乏校正為在聚光鏡色差。 具有良好的校正聚光鏡將產(chǎn)生很少或沒有顏色膜片一個非常尖銳的輪廓。 視場光闌現(xiàn)在打開直到大約四分之三的視場中是可見的，聚光鏡，然后重新聚焦（圖6（c））。 檢查聚光鏡的對齊方式，必要時重新調(diào)整。 現(xiàn)在打開的視場光闌，直到它剛好*出視場（觀察），或在顯微攝影的情況下，剛好*出光罩標(biāo)記定義捕獲膜的面積。 打開視場光闌任何更遠(yuǎn)是不必要的，會導(dǎo)致過多的眩光和對比度損失。
下一個步驟是除去目鏡1和同行向下顯微鏡的管，如圖7（a）所示。 當(dāng)你查看下管，打開和關(guān)閉聚光鏡孔徑光闌看到自己的形象在物鏡的后焦平面。 如果有內(nèi)置到在顯微鏡底座上的光路中的磨砂玻璃漫射器濾波器，光的均勻發(fā)光的圓圈將是可見的。 如果沒有這樣的過濾器在光路中，你反而會看到燈絲的形象，在圖7（b）所示（以取代被刪除的目鏡，或勃氏鏡插入定心或相位望遠(yuǎn)鏡將使這次調(diào)整更容易看到）。
這個動作的目的是設(shè)置孔徑光闌的大小，以*大化圖像的對比度，并獲得試樣的*佳圖像，而不會引入分辨率的損失，由于折射和衍射的工件。 一般的經(jīng)驗(yàn)法則是設(shè)置60和90％的整個光盤看出，在目鏡管的大小之間的孔徑光闌。
在一些情況下，部分封閉的孔徑光闌的邊緣不是同心的物鏡的照明系統(tǒng)后焦平面。 這是因?yàn)闊o論對臺下聚光器或物鏡的錯位，以及制造商的使用說明書應(yīng)征詢正確的定心制度。 有些顯微鏡是在一個固定的中心位置那是不可能在實(shí)驗(yàn)室中改變出廠時的孔徑光闌。 暗場和相襯聚光鏡通常總是將提供一個定心機(jī)構(gòu)，由于這一步設(shè)立顯微鏡對這些照明方式的重要方面。 聚光鏡光圈應(yīng)該用40倍或60倍的物鏡為中心，以避免重新中心的每一個物鏡（低倍率物鏡，將使用這種方法幾乎總是落在可以接受的邊界內(nèi)）的隔膜。
現(xiàn)在，科勒照明已經(jīng)建立了10倍的物鏡，就必須牢記的是，改變到一個更高的倍率物鏡將需要外地和孔徑光闌的重新調(diào)整。 例如，如果你切換到40倍的物鏡，你將不得不有點(diǎn)接近視場光闌和重新中心吧（看樣品的一個較小的區(qū)域）。 還有，聚光鏡孔徑光闌應(yīng)稍微打開（在40×物鏡具有更高的數(shù)值孔徑比不10x物鏡）。 物鏡的每次改變，兩個隔膜，必須根據(jù)上面概述的步驟來調(diào)節(jié)。
科勒照明的條件并不在倍率使用較低倍率的物鏡（5倍以下）適用。 在準(zhǔn)備低倍鏡，先對準(zhǔn)顯微鏡，并使用10倍的物鏡調(diào)整光學(xué)通路進(jìn)行適當(dāng)?shù)目评照彰鳌?/span> 大多數(shù)現(xiàn)代顯微鏡聚光鏡具有頂透鏡旋出光路的使用與5倍的放大倍率的物鏡和下方，如圖8中所示。 其他聚光鏡型號有*鏡頭，可以擰松或有聚光鏡的旋轉(zhuǎn)炮塔與低和高放大倍率的物鏡使用。
當(dāng)旋開式透鏡從光路取出，聚光鏡的性能從根本上改變，并且孔徑光闌不再起作用，以控制照明光的數(shù)值孔徑。 為了避免漸暈，聚光鏡孔徑光闌應(yīng)打開到其*寬的設(shè)定，標(biāo)本對比度控制與視場光闌，它現(xiàn)在控制照明光的數(shù)值孔徑。
通過適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)顯微鏡科勒照明，樣品將被充分照射均勻，無眩光，提供良好的圖像分辨率和對比度。 欲了解更多信息，請咨詢我們的理論部分科勒照明和/或基礎(chǔ)知識顯微鏡照明 。 關(guān)于顯微鏡照明的參考材料，也可以在我們的發(fā)現(xiàn)參考書目并在部分網(wǎng)絡(luò)資源 ，其中包含指向其它顯微鏡的網(wǎng)站。