徠卡顯微鏡光遺傳學(xué)去多色工具

2020-09-04 09:50:44

 光遺傳學(xué)是一種技術(shù),可以讓科學(xué)家們通過設(shè)計他們表達(dá)光敏蛋白來控制神經(jīng)元的電活動與光芒。 在過去的十年中,它已成為一種非常強(qiáng)大的工具,用于發(fā)現(xiàn)不同類型的細(xì)胞的功能,在大腦中。

大多數(shù)這些光敏感蛋白,被稱為視蛋白,在藍(lán)綠色范圍響應(yīng)的光。 現(xiàn)在,來自麻省理工學(xué)院的一個小組發(fā)現(xiàn)了一個視蛋白是紅色光,這使得研究人員能夠獨立控制神經(jīng)元的兩類人群的活動一次,使腦功能更復(fù)雜的研究敏感。

“如果你想看到兩組不同的細(xì)胞相互作用,或同一小區(qū)的兩個群體是如何互相競爭,你需要能夠獨立激活這些人口,”埃德寶鼎生物工程副教授,并說腦與認(rèn)知科學(xué)在麻省理工學(xué)院和新的研究的資深作者。

新視蛋白是在120種藻類的屏幕找到約60光敏感蛋白之一。 這項研究發(fā)表在自然法的2月9日在線版,也取得了最快的視蛋白,使研究人員能夠研究神經(jīng)活動模式與毫秒級的精度。

寶鼎和甘恩嘉澍黃醫(yī)藥和生物科學(xué)在阿爾伯塔大學(xué)的教授,是該論文的高級作者,而主要作者是麻省理工學(xué)院博士后彌敦道Klapoetke。 來自霍華德休斯醫(yī)學(xué)研究所的Janelia農(nóng)場研究校園,賓夕法尼亞大學(xué),科隆大學(xué)和北京基因組研究所的研究人員也促成了這項研究。 
奧林巴斯顯微鏡

圖片:村田泰信,麥戈文研究所

 

在生活的色彩

視蛋白天然存在于許多藻類和細(xì)菌,它使用光敏感蛋白,以幫助他們應(yīng)對其環(huán)境和產(chǎn)生能量。

實現(xiàn)神經(jīng)元的光控制,科學(xué)家工程師腦細(xì)胞表達(dá)的基因的視蛋白,該轉(zhuǎn)運的離子穿過細(xì)胞膜,以改變其電壓。 根據(jù)所使用的視蛋白,在細(xì)胞上閃耀光要么降低了電壓和沉默神經(jīng)元放電或升壓電壓和引發(fā)細(xì)胞,以產(chǎn)生一個電脈沖。 這個效果幾乎是即時的和容易逆轉(zhuǎn)。

使用這種方法,研究人員可以有選擇地打開細(xì)胞或關(guān)閉的人口,觀察大腦中發(fā)生了什么。 然而,直到現(xiàn)在,他們可以在一個時間只能激活一個群體,因為這回應(yīng)了紅燈唯一的視蛋白也回應(yīng)了藍(lán)色的光,所以他們不能與其他視蛋白配對來控制兩臺不同的細(xì)胞群。

尋求額外的有用的視蛋白,麻省理工學(xué)院的研究人員與黃的研究小組在阿爾伯塔大學(xué),這是測序1,000植物,包括一些藻類的轉(zhuǎn)錄工作。 (轉(zhuǎn)錄組是相似的基因組,但僅包括由一個細(xì)胞,而不是它的遺傳物質(zhì)的整體表達(dá)的基因。)

一旦團(tuán)隊獲得,似乎代碼為視蛋白基因序列,Klapoetke測試了他們的光響應(yīng)在哺乳動物腦組織,與瑪莎君士坦丁 - 佩頓,生物學(xué)和腦與認(rèn)知科學(xué)的麻省理工學(xué)院教授,麥戈文學(xué)會會員工作,而該論文的作者。 紅色感光視蛋白,其中研究人員命名Chrimson,可以響應(yīng)光用735納米波長介導(dǎo)的神經(jīng)活動。

研究人員還發(fā)現(xiàn)了一個藍(lán)光驅(qū)動的視蛋白,它有兩個非常可取的特質(zhì):它工作在高速,這是非?;璋档墓饩€敏感。 這種視蛋白,稱為Chronos的,可以刺激與藍(lán)色光太弱激活Chrimson水平。

“你可以用昏暗的藍(lán)色光短脈沖來驅(qū)動藍(lán)色的,你可以使用強(qiáng)闖紅燈駕駛Chrimson,而且可以讓你做真正的兩色,零串?dāng)_激活完整的大腦組織,” Boyden小,誰是麻省理工學(xué)院媒體實驗室的成員,麥戈文腦研究所說。

研究人員曾試圖修改自然發(fā)生的視蛋白,使他們更快地做出反應(yīng)和應(yīng)對調(diào)光燈,但試圖優(yōu)化一個特點往往使其他功能惡化。

“很明顯,試圖工程師般的色彩,光感度和動力學(xué)特征的時候,總有取舍,”Klapoetke說。 “我們很幸運,自然的東西實際上是超過快好幾倍,也五六倍光敏感比什么都重要。”

選擇性控制

這些新的視蛋白借給自己幾種類型的研究,以前不可能,博伊登說。 為1,科學(xué)家不僅可以操縱感興趣的細(xì)胞群的活性,而且還控制上游的細(xì)胞通過分泌神經(jīng)遞質(zhì)影響目標(biāo)人群。

配對Chrimson和Chronos的也可以讓科學(xué)家在大腦中學(xué)習(xí)不同類型的細(xì)胞的功能,在同一個微電路。 這些細(xì)胞通常位于非常接近,但與新的視蛋白它們可以獨立地具有兩種不同顏色的光進(jìn)行控制。

“我認(rèn)為在這個優(yōu)秀的論文中描述的工具,代表了這兩個基礎(chǔ)和轉(zhuǎn)化神經(jīng)科學(xué)的一大進(jìn)步,”Botond Roska在,高級小組負(fù)責(zé)人在弗里德里希米歇爾生物醫(yī)學(xué)研究所在瑞士,誰是不是該研究小組的一部分說。 “被移向紅外范圍光遺傳學(xué)工具,如Chrimson本文中描述的,是不是更藍(lán)移的變體更好,因為它們是低毒性,激活更少的瞳孔反射,并激活患者更少的剩余的光感受器。 “

大多數(shù)光遺傳學(xué)研究迄今已在小鼠中已經(jīng)完成,但是Chrimson可用于果蠅,一種常用的試驗有機(jī)體的光遺傳學(xué)研究。 研究人員已經(jīng)用藍(lán)色感光視蛋白在果蠅,因為光線可以進(jìn)入果蠅的眼睛和驚嚇?biāo)麄儯谘芯恐械男袨楦蓴_了麻煩。

維韋克賈亞拉曼,一個研究小組負(fù)責(zé)人在Janelia農(nóng)場和論文的作者,能夠表明,當(dāng)紅燈是用來刺激Chrimson在果蠅這種驚嚇反應(yīng)不會發(fā)生。

因為紅燈損害較小的組織比藍(lán)色光,Chrimson還擁有潛在的人類最終的治療用途,博伊登說。 與其他視蛋白的動物研究已經(jīng)在幫助感光細(xì)胞在視網(wǎng)膜的損失后,對恢復(fù)視力表明承諾。

研究人員目前正在試圖修改Chrimson在紅外范圍內(nèi)響應(yīng)的光。 他們也努力使雙方Chrimson和Chronos的更快,更怕光。

該項目的麻省理工學(xué)院的部分得到了衛(wèi)生部,麻省理工學(xué)院媒體實驗室,美國國家科學(xué)基金會,華萊士閣下科爾特基金會,Alfred P. Sloan基金會,一個NARSAD青年研究者格蘭特,人類前沿科學(xué)計劃的國家研究院資助,一個NYSCF羅伯遜神經(jīng)科學(xué)研究員獎,IET自動對焦哈維獎,科學(xué)技術(shù)的斯科爾科沃學(xué)院,和珍妮特和謝爾頓拉辛'59。