奧林巴斯顯微鏡的表位標(biāo)記

奧林巴斯顯微鏡的表位標(biāo)記

表位（也稱為抗原決定簇 ）是生物結(jié)構(gòu)或序列，例如蛋白質(zhì)或碳水化合物，它是由一種抗體作為抗原識(shí)別。 當(dāng)形成在其中的氨基酸或糖線性排列的蛋白質(zhì)或多糖的面積適當(dāng)?shù)慕Y(jié)構(gòu)發(fā)生了抗原的識(shí)別。 大多數(shù)蛋白質(zhì)通常有幾種表位。 抗體提供了一個(gè)重要的技術(shù)（稱為免疫測定 ），用于識(shí)別特定細(xì)胞成分（蛋白質(zhì)，脂質(zhì)，碳水化合物等），以跟蹤功能，分發(fā)和修改的生活和固定細(xì)胞內(nèi)的感興趣的蛋白質(zhì)。

所述抗體通常是通過精煉目的蛋白質(zhì)并在兔或小鼠注射它獲得。 但是，這需要時(shí)間的顯著時(shí)期，也有在抗體創(chuàng)建失敗，很多情況下（沒有表位）。 然而，在DNA重組技術(shù)的*新進(jìn)展已使人們有可能創(chuàng)造一個(gè)融合蛋白，其中感興趣的蛋白質(zhì)結(jié)合與蛋白質(zhì)（肽）的小片段工作作為表位。 具有標(biāo)記的表位的蛋白質(zhì)然后可以通過使用特異性抗體的表位來檢測。

奧林巴斯顯微鏡用表位標(biāo)記是類似于構(gòu)建綠色熒光蛋白（ 兩性平等問題協(xié)調(diào) ）的重組的做法。 從目標(biāo)蛋白質(zhì)的基因插入到表位標(biāo)簽矢量和所述目標(biāo)蛋白與它的標(biāo)簽是由載體的轉(zhuǎn)染細(xì)胞中表達(dá)。 該蛋白質(zhì)是根據(jù)蛋白質(zhì)的原始屬性在細(xì)胞內(nèi)分布。 當(dāng)使用兩性平等問題協(xié)調(diào)，靶蛋白可以容易地觀察到，因?yàn)镚FP標(biāo)簽發(fā)出熒光; 然而，使用表位標(biāo)記時(shí)，靶蛋白可以僅通過免疫學(xué)方法，因?yàn)楸砦粯?biāo)簽是不起作用的細(xì)胞中檢測到。（奧林巴斯顯微鏡）

表位標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)

• 重組方法提供了一個(gè)非常短的時(shí)間內(nèi)要求相比普通抗體制劑，這需要*過一個(gè)月免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

• 使用單一的表位標(biāo)簽，在檢體的各種蛋白質(zhì)可通過相同的標(biāo)記特異性抗體來檢測。

• 重組標(biāo)簽?zāi)軌蛞暂^低的成本比抗體制劑來完成。

• 表位標(biāo)簽是由3至14個(gè)氨基酸，并且不破壞正常的蛋白質(zhì)的功能。

• 表位標(biāo)記可以使用兩種蛋白質(zhì)具有相似的抗原之間進(jìn)行區(qū)分。

• 該技術(shù)可以用于檢測蛋白質(zhì)，是非常困難的分離和純化。

下表顯示了通常用作表位標(biāo)簽的氨基酸安排：

發(fā)現(xiàn)

直接和間接的方法可以用于像熒光抗體技術(shù)。 與直接的方法，所述抗體為標(biāo)記標(biāo)記有熒光染料，同時(shí)用間接法，針對該標(biāo)記的抗體作為初級抗體被施加并在該標(biāo)記有熒光染料的二抗進(jìn)行檢測。

有關(guān)表位標(biāo)記的更多信息，請參考羅氏網(wǎng)站上的實(shí)驗(yàn)手冊。