尼康顯微鏡黃色激發(fā)塊Texas Red HYQ（帶通）
尼康顯微鏡黃色激發(fā)塊Texas Red HYQ（帶通）
紫外可見和近紅外透射為尼康Texas Red HYQ高性能濾波器組合頻譜輪廓下面示于圖1.該濾波器組是一個(gè)兩尼康黃色激發(fā)組中，這兩者都采用的帶通發(fā)射（阻擋）濾波器而不是一個(gè)長通品種，以便限制從熒光團(tuán)發(fā)射的量，組合優(yōu)化的波長區(qū)域以外的干擾。 在75納米發(fā)射窗（608至683納米）是結(jié)合了介質(zhì)寬度（55納米）激發(fā)通帶（532至587納米），以允許選擇性地激發(fā)和檢測特定熒光團(tuán)受歡迎，這是在多個(gè)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)常用的。 Texas Red HYQ濾波器組合配備有595納米（截止波長）長通二色鏡。
黃色激發(fā)濾光片座Texas Red HYQ規(guī)格：
激發(fā)波長篩選：532-587納米（帶通，560 CWL）
雙色鏡截止波長：595納米（長通，LP）
屏障過濾波長：608-683納米（帶通，645 CWL）
Texas Red HYQ濾波器組合被設(shè)計(jì)，以增加次級(jí)熒光的亮度，而不產(chǎn)生在信噪比的相應(yīng)增加。 更陡的通帶是通過增加在兩個(gè)激發(fā)和發(fā)射濾光片干涉腔的數(shù)量，從而使頻譜輪廓之間的更接近創(chuàng)建。 所得更寬和更陡的濾波器通帶使該組，以提供更多的激發(fā)能量并捕獲熒光信號(hào)的更高的水平。 該過濾器組合與流行的熒光探針得克薩斯紅色和CY3.5進(jìn)行了優(yōu)化，當(dāng)單獨(dú)或多重標(biāo)記技術(shù)被用于他們，并且也建議由黃色波長的激發(fā)熒光等應(yīng)用。 帶通發(fā)射濾波器功能，以減少或消除從熒光團(tuán)發(fā)射的深紅色或近紅外光譜區(qū)的干擾。 Texas Red HYQ濾波器組合被設(shè)計(jì)為尼康Y-2E / C組的較高的能量的變化，與更廣泛的激發(fā)和發(fā)射濾光器透射區(qū)域。它適合于用基本相同的組的探針的使用，同時(shí)提供對(duì)這些發(fā)光*出在Y-2E / C發(fā)射帶的上限改進(jìn)的性能。(奧林巴斯顯微鏡)
因?yàn)橛膳蛎浖ぐl(fā)和發(fā)射通帶區(qū)域允許增加的能量傳輸，與Texas Red HYQ集合產(chǎn)生的圖像通常是亮的并顯得比那些從類似Y 2E / C組合更紅。 Texas Red HYQ，CY3.5，氨基放線菌素D（AAD），酸性品紅，Alexa Fluor 568和594，茜素絡(luò)合劑，BOBO-3，BO-PRO-3，BODIPY：學(xué)習(xí)以下熒光當(dāng)Texas Red HYQ過濾器設(shè)置建議，ROX（羧基-X-羅丹明），DiBA**（5），HcRed，LDS 751（結(jié)合的RNA），MitoTracker紅，MRFP-1（單體紅色熒光蛋白），naphthofluorescein，SYPRO紅，SYTO 17（59,61， 64），YO-PRO-3，和YOYO-3。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對(duì)不同細(xì)胞內(nèi)位置黃色吸收熒光探針的這種過濾器組合的性能。
示于圖2（a）是從大鼠袋鼠腎（PTK2線）的上皮細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記與初級(jí)抗波形蛋白（一種中間絲蛋白）的小鼠單克隆抗體的培養(yǎng)的熒光發(fā)射隨后的山羊抗小鼠Fab片段結(jié)合到羅丹明紅。 *大吸收羅丹明紅的是570納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在590納米。 角蛋白是一類形成單絲，中間絲的一種類型，存在于細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的水不溶性蛋白質(zhì)。 另外，將試樣同時(shí)染色用DAPI核DNA。 注意沒有來自藍(lán)色熒光團(tuán)（DAPI），其不能有效地由黃色光激發(fā)信號(hào)的，但是從羅丹明標(biāo)記波形蛋白中間纖維網(wǎng)的高水平的紅色熒光強(qiáng)度。
由薄小鼠腎臟的部分沾上多個(gè)（3）的熒光團(tuán)的熒光發(fā)射強(qiáng)度顯示在圖2（b）。 在組織切片細(xì)胞核靶向與核酸探針的DAPI，當(dāng)在細(xì)胞培養(yǎng)物和組織切片結(jié)合到DNA，其具有*大激發(fā)在358納米，并且具有發(fā)射*大值在461納米。 另外，低溫恒溫器部也同時(shí)沾上的Alexa Fluor 488麥胚凝集素（腎小球和曲小管）和Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽（絲狀肌動(dòng)蛋白和刷狀緣）。 注意沒有信號(hào)的同時(shí)從藍(lán)色（DAPI）和綠（的Alexa Fluor 488）探針，但強(qiáng)烈的紅色熒光由于的Alexa Fluor 568中的肌動(dòng)蛋白和刷狀緣的網(wǎng)絡(luò)的存在。
印度麂的鹿皮沾上的Alexa Fluor 568綴合鬼筆環(huán)肽，其結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)絲狀肌動(dòng)蛋白網(wǎng)絡(luò)的成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)，示于圖2的（c）。 *大吸收的Alexa Fluor 568的是578納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在603納米的可見光譜的橙色區(qū)域。 另外，將試樣同時(shí)用DAPI染色（在細(xì)胞核靶向DNA;藍(lán)色發(fā)光）和MitoTracker綠FM（靶向線粒體;綠色發(fā)光）。 注意沒有信號(hào)從綠色（MitoTracker）和藍(lán)色（DAPI）的熒光團(tuán)，它們是不能有效地激發(fā)在黃色的波長，但明亮的橙紅色熒光的肌動(dòng)蛋白絲發(fā)揮。
圖2（D）展示了從HeLa細(xì)胞的培養(yǎng)即進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記的同隨后綴合的Alexa Fluor 546的吸收*大值的Alexa的山羊抗-小鼠Fab片段初級(jí)抗組蛋白（鍋）的小鼠單克隆抗體的熒光發(fā)射強(qiáng)度氟546是556納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在573納米（在可見光光譜的黃色區(qū)域）。 *抗體，從HeLa細(xì)胞的純化核級(jí)分生產(chǎn)，特異性結(jié)合的抗原決定簇，其存在于所有五個(gè)組蛋白（H1，H2A，H2B，H3和H4）。 注意從兩個(gè)間期核和單核前期強(qiáng)勁的紅色熒光強(qiáng)度。
大鼠胸主動(dòng)脈（平滑?。┤旧募?xì)胞與MitoTracker紅CMXRos，其靶向細(xì)胞內(nèi)的線粒體的網(wǎng)絡(luò)，在圖2（e）是示出。 *大吸收MitoTracker紅CMXRos的是579納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在599納米。 另外，將試樣同時(shí)用DAPI染色（在細(xì)胞核靶向DNA;藍(lán)色發(fā)光）和BODIPY FL-phallacidin（靶向肌動(dòng)蛋白;綠色發(fā)光）。 注意沒有信號(hào)從藍(lán)色（DAPI）和綠（BODIPY）熒光團(tuán)，但明亮的紅色熒光被管狀線粒體發(fā)揮。
由薄腳輪豆的部分自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度（ 蓖麻 ）組織表現(xiàn)出如圖2（f）所示。 在植物組織中的內(nèi)源性的自發(fā)熒光產(chǎn)生于各種生物分子，包括葉綠素，β-胡蘿卜素，葉黃素和。 在黃色激發(fā)區(qū)域，葉綠素具有吸收帶具有低消光系數(shù)，但仍然產(chǎn)生熒光的檢測水平在580納米的發(fā)射波長和上述（橙色和紅色）。 對(duì)于以上所說明的腳輪豆薄部分，注意自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度的在紅色光譜區(qū)的存在，但不存在強(qiáng)度中的低級(jí)（綠色和藍(lán)色）的波長。