尼康顯微鏡紫外激發(fā)塊藍(lán)色熒光蛋白（帶通）
紫外線和用于高性能尼康藍(lán)色熒光蛋白可見光透射光譜圖（BFP）濾波器的組合在圖1，本濾波器組由使用帶通發(fā)射濾波器，其不同于紫羅蘭組中的另外兩個(gè)50納米以下所示通帶（435-485納米）限制檢測到的那些發(fā)射在藍(lán)光光譜區(qū)域的熒光染料。 此外，窄22納米的激發(fā)帶通（延伸至僅401納米）*大程度地減少自體熒光，并且被耦合以較低的二色鏡截止波長（420納米）相比被用在其它紫色過濾器集。 雖然主要設(shè)計(jì)用于熒光蛋白的成像，此帶通發(fā)射組合是用于獲得具有多個(gè)標(biāo)簽標(biāo)本圖像時(shí)熒光團(tuán)中的一個(gè)是有效地激發(fā)在紫色光譜區(qū)域是有用的。
紫激發(fā)濾光片座BFP規(guī)格：
激發(fā)波長篩選：379-401納米（帶通，390 CWL）
雙色鏡截止波長：420納米（長通，LP）
屏障過濾波長：435-485納米（帶通，460 CWL）
BFP濾波器塊被設(shè)計(jì)為*佳性能與藍(lán)色熒光蛋白，并通過利用帶通發(fā)射濾波器，紅色和綠色熒光的在乘法 - 標(biāo)記的試樣在黑色背景上排除的檢測，產(chǎn)生的圖像具有豐富的和深藍(lán)色的顏色。 窄帶寬激發(fā)濾光片旨在減少或消除內(nèi)源性煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的激發(fā)在紫外線和紫色波長的光。 學(xué)習(xí)下面的熒光團(tuán)時(shí)，BFP過濾器組合推薦：藍(lán)色熒光蛋白，增強(qiáng)藍(lán)色熒光蛋白，*發(fā)光藍(lán)色熒光蛋白，瀑布藍(lán)，兒茶酚胺，熒光胺，羥基香豆素，Leucophor SF，太平洋藍(lán)，以及TNS。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對(duì)不同細(xì)胞內(nèi)位置紫羅蘭吸收熒光探針的這種過濾器組合的性能。
示于圖2（a）和2（e）是從印 度麂的培養(yǎng)鹿皮成纖維細(xì)胞進(jìn)行了免疫熒光標(biāo)記與任一主抗牛的α-微管蛋白的發(fā)光強(qiáng)度（圖2（a））或抗OXPHOS復(fù)合V抑制劑蛋白（圖2（e））的隨后偶聯(lián)于太平洋藍(lán)山羊抗-小鼠Fab片段的小鼠單克隆抗體。 *大吸收太平洋藍(lán)的是410納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在455納米。 注意細(xì)胞內(nèi)微管的突出染色（圖2（a））和線粒體（圖2（e））的網(wǎng)絡(luò)上延伸遍及在這些標(biāo)本的細(xì)胞質(zhì)中。(奧林巴斯顯微鏡)
圖2（b）表示由薄小鼠腎臟的部分用DAPI染色，將Alexa Fluor 488麥胚凝集素，綠色熒光的凝集素是特定于腎小球和曲小管的熒光發(fā)射強(qiáng)度。 *大吸收的DAPI的是358納米，并且發(fā)射*大值是461納米。 另外，檢體被同時(shí)染色的Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽（絲狀肌動(dòng)蛋白）。注意沒有光譜滲出通過從紅色和綠色的熒光團(tuán)。 圖2（D）呈現(xiàn)具有用DAPI染色的細(xì)胞核牛肺動(dòng)脈培養(yǎng)細(xì)胞。 盡管DAPI的熒光團(tuán)通常是用紫外線激發(fā)濾光片組合使用，許多紫色過濾器集能產(chǎn)生極好的影像。
從大鼠袋鼠腎上皮細(xì)胞（PTK2線）的培養(yǎng)深藍(lán)色熒光發(fā)射強(qiáng)度是在圖2的（c）。 將培養(yǎng)物免疫熒光標(biāo)記與初級(jí)抗細(xì)胞角蛋白（一種中間絲蛋白），隨后偶聯(lián)至碼頭藍(lán)山羊抗-小鼠Fab片段的小鼠單克隆抗體。 *大吸收碼頭藍(lán)的是365納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在460納米。 另外，將試樣同時(shí)染色線粒體與MitoTracker紅CMXRos。 注意沒有信號(hào)從紅色熒光團(tuán)與該帶通發(fā)射濾波器的組合。
自身熒光在植物組織（玉米粒組織部分）在圖2（f）中表示的，并表明內(nèi)源性熒光團(tuán)在這些標(biāo)本的深藍(lán)色發(fā)光光譜。 注意，與BFP濾波器組合表現(xiàn)出少得多的背景熒光比所述長通發(fā)射（Ⅴ-1A和V-2A）紫色激發(fā)過濾器集的拍攝圖像。