奧林巴斯顯微鏡著色劑黑白顯微攝影吸收特性

2020-09-03 14:08:26

柯達(dá)雷登濾波器的吸收和傳輸特性,載于柯達(dá)照相濾波器手冊(cè) (公開號(hào)B-3),其中包括在不同波長(zhǎng)的光譜數(shù)據(jù)的表格。 一個(gè)典型的可見光吸收光譜對(duì)這些濾波器,雷登號(hào)34a的1,示于圖1。在這個(gè)圖中,吸收(漫射密度)被繪制為波長(zhǎng)為300?700毫微米的函數(shù)。

奧林巴斯顯微鏡

該過濾器34a的有很強(qiáng)的吸收帶在370納米,在光譜的紫外區(qū),而在可見光譜的綠色 - 黃色過渡區(qū)域的另一個(gè)中心在560納米。 該過濾器通過或發(fā)送波長(zhǎng)的漫射密度小于0.1,所以由圖34A濾波器發(fā)送的波長(zhǎng)范圍是410至470納米(藍(lán)光)和660至700納米(紅色光)。

奧林巴斯顯微鏡

濾波器的傳輸帶被方便地表示為條形圖,如在圖2中所示的暗區(qū)表示傳送區(qū)域由*過10%的過濾器,和較亮區(qū)域代表波長(zhǎng)阻斷過濾器中的之一。 這種類型的曲線圖提供了用于比較的一組過濾器,以快速地確定合適的濾波器,用于任何特定應(yīng)用的簡(jiǎn)單索引。

條形圖為共同柯達(dá)雷登彩色濾光片的匯編,列于表1。使用該表作為參考在選擇過濾器,以提高使用黑白顯微攝影染色標(biāo)本的對(duì)比。

常見的生物著色劑吸收和傳輸特性發(fā)表在Sigma-Aldrich公司手冊(cè)著色劑,染料,以及指標(biāo)HJ康涅狄格州的生物染色劑 ,其中包括數(shù)百染料的實(shí)際光譜數(shù)據(jù)。 用于紅色(剛果紅),綠(孔雀綠)和藍(lán)色典型可見光吸收光譜(亞甲基藍(lán))的染料示于圖1。在該圖中,吸收(漫射密度)被繪制為波長(zhǎng)從300到功能700納米。

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剛果紅具有很強(qiáng)的吸收帶在340毫微米的近紫外區(qū)和另一個(gè)在500納米的藍(lán)綠色的過渡區(qū)域附近。 該染料透過紅色波長(zhǎng)高于560納米,因此,會(huì)出現(xiàn)紅色的眼睛。 視覺上顯示為綠色染料,孔雀綠具有很強(qiáng)的吸收帶中心在600納米的黃紅色過渡區(qū)域附近,以400和550納米之間的寬的傳輸頻帶(傳遞藍(lán)色和綠色光)。 亞甲藍(lán)具有很強(qiáng)的吸收帶中心在660納米,在可見光譜的紅色區(qū)域,和低于600納米的發(fā)射波長(zhǎng),贈(zèng)與藍(lán)色的染料。

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當(dāng)漫射密度(吸收)由染色*過0.1,所述波長(zhǎng)帶落下大于0.1被認(rèn)為是吸收的區(qū)域內(nèi)。 這可以方便地表示為條形圖,如在圖2中示出的那些的較暗區(qū)域表示吸收區(qū)域由*過0.1的漫射密度的染料,和較亮區(qū)域代表波長(zhǎng)傳遞(不吸收)的染料。 這種類型的曲線圖提供了用于比較的一組染料的快速確定合適的染料為任何特定染色應(yīng)用了一個(gè)簡(jiǎn)單的索引。(奧林巴斯顯微鏡)

條形圖為常見的生物著色劑的匯編,列于表1。使用該表作為參考在選擇染料染色生物標(biāo)本使用黑白膠片顯微攝影。

常見的生物著色劑光譜吸收特性
污點(diǎn)光譜吸收
酸性品紅

530-560

苯胺藍(lán)

550-620

天青B

580+

天青?

580-640

堿性品紅

520-570

燦爛甲酚藍(lán)

550+

胭脂紅

500-570

剛果紅

400-560

水晶紫

550-610

達(dá)羅紅

450-550

曙紅Y

490-530

赤蘚紅B

510-540

乙基曙紅

530-550

快綠

560+

姬姆薩

500+

淺綠色SF

590+

Luxol快速藍(lán)色

500-640

甲基綠

560+

亞甲基藍(lán)

590+

中性紅

480-570

苯胺黑

450+

核固紅

460-550

橙G

450-510

地衣紅

500-620

桃紅B

520+

普魯士藍(lán)

560+

派洛寧B

510-560

藏紅花

350-480

藏紅

470-550

蘇丹IV

470-580

蘇丹紅

450-590

檸檬黃

400-460

甲苯胺藍(lán)

560+

臺(tái)盼藍(lán)

500+

賴特

500+

納米400500600
<紫外線紅外線>
表1