奧林巴斯顯微鏡光路梯度和強(qiáng)度分布

2020-09-03 14:08:22

在經(jīng)歷了由正交波前穿過在微分干涉對比(DIC)顯微鏡標(biāo)本的光路差由光學(xué)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換為振幅的變化在目鏡觀察到的*終圖像。這種互動式的教程探討了各種半透明的標(biāo)本光路梯度和幅度(強(qiáng)度)型材之間的關(guān)系。

教程初始化與一個隨機(jī)選擇的標(biāo)本圖像顯示在左側(cè)的窗口,以及一對對角線藍(lán)線以45度角慢慢遍歷圖像的檢體部分。諾馬斯基棱鏡在微分干涉顯微鏡的剪切軸(x)由雙頭白色箭頭位于檢體圖像窗口(的下角所示注:在顯微鏡的剪切軸線平行于所述對角線)。作為對角線藍(lán)線跨越圖像行進(jìn),對應(yīng)于該兩個藍(lán)色線之間的薄角切片試樣的振幅信息標(biāo)在DIC振幅資料窗口。此外,光程差(OPD)沿對角線切片呈現(xiàn)在光程差窗口。奧林巴斯顯微鏡

以手動操作教程,先點(diǎn)擊暫停按鈕來停止雙藍(lán)線的議案。接下來,放置在線路的鼠標(biāo)光標(biāo),然后點(diǎn)擊并拖動線跨越圖像在沿著試件表面的任何切片,以查看振幅型材和光程差的變化。以這種方式,不同的振幅信息和關(guān)系到相應(yīng)的光程差,可以檢測和比較,在對試樣和周圍背景的每個點(diǎn)。經(jīng)過一個標(biāo)本已被徹底研究,使用選擇一個樣本下拉菜單中選擇具有不同的配置文件的新標(biāo)本。該Applet速度滑塊可以用于改變在其中藍(lán)色對角線自動遍歷試樣圖像的速度。

之后,由分束棱鏡產(chǎn)生正交波前穿過標(biāo)本相梯度,它們是通過微分干涉由第二棱鏡和分析器(另一個偏振片)重組,得到梯度的高對比度的再現(xiàn)。兩個微分干涉對比,相位相反的依靠取樣光束和參考光束之間樣品的相位差的基礎(chǔ)上變化的幅度,以產(chǎn)生一個圖像。相襯轉(zhuǎn)換從通過檢體和參考光束穿過聚光鏡纖維環(huán),試樣,并且相板衍射光波之間呈現(xiàn)的相位變化圖像振幅信息。在區(qū)別,然而,DIC圖像對應(yīng)從試樣的光程差所得的梯度分布到數(shù)學(xué)*衍生物,而不是幅度。

奧林巴斯顯微鏡

光路梯度和在DIC顯微鏡強(qiáng)度分布之間的關(guān)系示于圖1中。圖1中呈現(xiàn)的樣品(a)是一個環(huán)形人紅血球與由雙指示的剪切軸微分干涉相襯成像的高倍率-headed箭頭(西北向東南)。光程差(縱軸)與紅細(xì)胞的沿剪切軸(橫坐標(biāo))的橫截面的曲線圖顯示在圖1(b)中。請注意,光路配置文件反映薄中心厚邊人類血細(xì)胞展出。橫跨微分干涉反差圖像的強(qiáng)度掃描,這非常接近地對應(yīng)于所述光學(xué)路徑差曲線的*導(dǎo)數(shù)(圖1(b))時加入到一個常數(shù),是在圖1(c)中。在紅細(xì)胞光學(xué)路徑剖面正和負(fù)斜坡產(chǎn)生較高和較低的振幅,分別在一階導(dǎo)數(shù)的掃描和相應(yīng)的微分干涉對比圖像的區(qū)域。表現(xiàn)出在斜率不變化的光程差分布的區(qū)域具有相同的強(qiáng)度為背景和對應(yīng)于光程差的一階導(dǎo)數(shù)曲線的基線。