奧林巴斯顯微鏡：纖維的FISH（熒光原位雜交）

這個(gè)術(shù)語(yǔ)是指纖維的FISH的普遍做法進(jìn)行準(zhǔn)備延長(zhǎng)染色質(zhì)纖維的熒光原位雜交（FISH）。映射還通過進(jìn)行FISH調(diào)查，在染色體上的DNA片段，在幾百萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)的距離之內(nèi)的信號(hào)彼此由于多方面的結(jié)構(gòu)在中期染色體的DNA鏈?zhǔn)菬o法區(qū)分的。染色體信號(hào)的分辨率提高了，如果之前使用它們進(jìn)步充分冷凝。我們可以做些什么，當(dāng)我們要映射多個(gè)相鄰的DNA克隆嗎？創(chuàng)建地圖規(guī)模的一個(gè)堿基對(duì)整個(gè)基因組DNA序列的特性，將解決這個(gè)問題，但是是非常耗時(shí)的。

人類基因組的計(jì)算包含30,000-100,000基因，也就是說，1,200-4,000平均每條染色體基因。10-15千堿基對(duì)的平均大小排隊(duì)間隔40-45千堿基對(duì)的DNA鏈的基因。需要新的程序，以便產(chǎn)生包含這些基因的DNA片段的詳細(xì)地圖。

以下討論兩種機(jī)制來克服的分辨率限制使用時(shí)遇到的FISH中期染色體。段映射下有一萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)（Mbps）的分辨率可通過使用拉伸染色質(zhì)（DNA）纖維。

映射在一萬(wàn)個(gè)基對(duì)（Mbps）的分辨率 

· FISH上相間核 -可以創(chuàng)建使用間期核染色質(zhì)纖維延伸到細(xì)胞核的高分辨率地圖，因?yàn)樗麄兏煺箷r(shí)相比，在中期染色體（參見圖1）。本程序是可用于映射在分辨率為50-500千堿基對(duì)的DNA克隆，但其準(zhǔn)確性有所減少，因?yàn)槿旧|(zhì)纖維的延伸度各不相同。

· 擴(kuò)展的染色質(zhì)纖維的制備 - FISH檢測(cè)信號(hào)，較高的分辨率的方法，得到，通過人為延伸的DNA雜交（圖1）之前，在載玻片上的染色質(zhì)纖維。 

纖維的FISH過程 

· 細(xì)胞分散在載玻片上，空氣干燥。

· 洗滌劑（曲拉通X-100）在密閉容器中，在載玻片上的細(xì)胞裂解。

· 染色質(zhì)纖維的高度時(shí)，它慢慢地從容器中取出的載玻片。

· 的制備用乙醇固定。

· 上面的距離為5-700千堿基對(duì)的高的分辨率FISH成為可能。

· 探針進(jìn)行雜交后的標(biāo)準(zhǔn)程序。

目前用于纖維的FISH命令了一系列從染色體克隆的DNA片段，并估計(jì)這些克隆之間的距離。然而，仍然必須進(jìn)行檢查DNA鏈的亞微觀層面更多的細(xì)節(jié)。亞顯微測(cè)量的難度使得跟蹤和距離測(cè)量不清楚。目前的研究正在探索潛在的方法可同時(shí)檢測(cè)信號(hào)和DNA鏈。掃描探針顯微鏡是一種很有前途的候選人。