奧林巴斯顯微鏡：暗視野顯微鏡故障排除

2020-09-04 09:30:35

有許多相關(guān)的常見問題與暗視野顯微鏡和顯微攝影或數(shù)字成像。 這些范圍從使用不正確的大小視場光闌足夠的照明和聚光鏡失準。 暗場照明問題都與臺下聚光器，這應該是第一個問題，當事情不正常工作。 成像標本時使用這種技術(shù)，下面的問題和解決辦法應作為一個指南。



問題： 
有足夠的照明，使樣本可見，，或試樣是可見的，但非常微弱的。


解決方案 ：燈電壓可設置得太低，或燈泡可能沒有足夠的強度，以適當?shù)卣樟猎嚇印?nbsp;最多約12伏的電壓升高（為12伏，100瓦鎢鹵素燈泡）或更換光源，如果可能的話，與一個更大的強度。 如果不解決這個問題，檢查臺下聚光器，以確保其適當?shù)拇笮∨c視場光闌的正確定位。 另外，檢查的顏色和/或中性密度濾光片，偏光片，相位差板，或任何其他組件，可能減少照明強度的光路徑。 

如果這個問題出現(xiàn)高數(shù)值孔徑反映聚光鏡，檢查聚光鏡頂級鏡頭是正確的顯微鏡幻燈片底部的油。 如果浸沒接觸已被打破，重新把聚光鏡油和架起來，直到頂端透鏡完全浸在油中，并在與底部的滑動接觸。




問題： 
視野有一個黑點在中心，減少光照強度，但在外圍的對象是良好的照明和顯示正常。


解決方案 ：要么是不正確的位置臺下聚光器或光站的物鏡是錯誤的大小。 小心地機架物鏡向上和向下，同時觀察在視野標本。 進行檢查，以一定的，兩個聚光鏡光圈和視場光闌被設置為敞開位置。 如果這并不影響照明，使它稍大或稍小的改變視場光闌的大小，然后重新檢查照明。 

有時候，這個問題產(chǎn)生，當顯微鏡載玻片過厚（更大的比標準1毫米的）。 使用千分尺或一組表卡尺來確定的厚度的滑動和滑動/蓋玻片組合。 如果滑動過厚時，要么改變正確的厚度的滑動或者“檢查聚光鏡，以確定它是否可以進行調(diào)整，以補償不同厚度的幻燈片。




問題： 
燈往往有一個很短的壽命，并與黑色蒸發(fā)鎢涂層的燈泡內(nèi)部的燒結(jié)。


解決方案 ：在過高的電壓很長時間，這肯定會減少壽命的燈泡已使用。更換燈泡和燈電壓降低后觀察和/或試樣的顯微攝影。




問題： 
圖像具有的明視野周邊帶或不帶在中心的暗區(qū)。


解決方案 ：這個問題是典型時，臺下聚光器錯誤地居中或視場光闌是太小了。 恢復到明視場，并重新建立的科勒照明條件，然后重復暗場過程中，確保聚光鏡的中心。 如果這沒有幫助，增加視場光闌的大小，直到適當?shù)陌祱鰲l件成立。 

這個問題也可能出現(xiàn)時使用的物鏡，過高的暗場聚光鏡的數(shù)值孔徑。 如果在物鏡內(nèi)部有一個可變光闌，降低光圈孔徑的大小來確定，如果太多的斜光進入的物鏡前透鏡。 此外，它可能有助于提高到一個更高的數(shù)值孔徑反射的暗場聚光鏡的視場光闌的大小或更改。




問題： 
僅在一側(cè)的外圍的視野是光明的。


解決方案 ：檢查物鏡轉(zhuǎn)換器，以確保物鏡被正確地定位在光軸的顯微鏡。 有一個定位的物鏡是適當?shù)奈恢脮r停止，將產(chǎn)生一個正的“啪嗒”。 如果不正確的中心視場光闌，也可能會出現(xiàn)的問題。 取下目鏡，并把相望遠鏡的眼睛管（或使用伯特蘭透鏡），然后使用中心的螺絲以正確對齊視場光闌。



問題： 
圖片的標本不明確，缺乏足夠的對比度和細節(jié)。


解決方案 ：暗視野顯微鏡的樣本可能不適合。 許多染色標本不分散足夠的光線暗場條件下可以清楚地成像。 試樣的厚度，也可能是一個問題，因為非常薄的樣品往往不成像以及從暗視野聚光鏡發(fā)射與傾斜光線。 切換到明場，相襯，DIC，霍夫曼調(diào)制對比度，以確定這是否提高了標本的對比。




問題： 
明亮的區(qū)域，重點阻撓的暗場標本的觀察和/或顯微攝影。


解決方案 ：這可能是由于灰塵，頭發(fā)，纖維，和/或聚光鏡上方某處的光學表面的臟物污染。 徹底清潔標本的光學級組織或棉花。 有時候，這個問題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。 小心地松開物鏡，其所在地的消防水***，慢慢地打開，而通過目鏡觀察樣品。 如果阻塞隨著旋轉(zhuǎn)的物鏡，那么它可能是由于灰塵上的前透鏡。 刪除的物鏡和滋潤鏡頭前輕輕地呼氣，然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長木桿。 更換的物鏡和檢查，以一定的阻礙已被完全刪除。




問題： 
均勻地照亮的背景，但不是全黑或出現(xiàn)灰色的顏色。


解決方法 ：這個問題通常發(fā)生在不透明的場站為物鏡太小。 取出的目鏡和查看的后焦平面上的一個光路中的樣本的情況下，無論是用相位望遠鏡或伯特蘭透鏡的物鏡。 整個背部焦平面應該是黑暗的，沒有任何邊緣明亮的光線出現(xiàn)在周圍。 如果觀察到的光的弧或圓中的物鏡的后焦平面上，改變到一個稍大的視場光闌。 此外，降低視場光闌的大小，將有助于在抑制眩光和一個烏黑背景，（注意不要關(guān)閉虹膜光圈太多）。



問題： 
燈聚光鏡的圖像部分地填充視野，遮蔽試樣的細節(jié)。


解決方案 ：可調(diào)節(jié)的滑動可能太薄或聚光鏡的太高。 測量厚度的顯微鏡幻燈片進行檢查，以確定油接觸不破。 如果遇到困難，保持底部的幻燈片油，請嘗試使用較厚的幻燈片。




問題： 
顏色出現(xiàn)在背景中，或用灰鑄鐵的背景光線不均。


解決方法 ：這個問題經(jīng)常發(fā)生在整個很厚的坐騎，或過多時，散射光污染工件的安裝介質(zhì)中捕獲。 倒閉的視場光闌和旋轉(zhuǎn)標本，以找到最好的方向，然后確定問題是否已得到糾正。 試樣可以被重新安裝在較薄的裝載或安裝介質(zhì)，可能需要進行過濾。 用柔軟的鏡頭紙或棉簽小心地清潔整個的顯微鏡載玻片和蓋玻片。




問題： 
查看水生生物的在水性安裝，標本漂在一個單一的方向不斷，難以觀察和顯微攝影。


解決方案 ：對流電流正在創(chuàng)建在蓋玻片的邊緣由于緩慢蒸發(fā)。 放置的胎圈，凡士林或Cytoseal安裝牢固地密封到顯微鏡載玻片上的周圍介質(zhì)的外周的蓋玻片。 商業(yè)產(chǎn)品是可用的，可以被加入到水中，以減緩這些微小的生物體的運動，使得它們更容易拍攝。




問題： 
當觀看試樣通過10x物鏡，有一個長橢圓形的光點的中心的視野。


解決方案 ：燈聚光鏡可能被錯誤地聚焦或擴散過濾器可能會丟失，導致的圖像出現(xiàn)在視野的燈絲。 重新聚焦在聚光鏡和作出若干光路中的過濾器是一種擴散。




問題： 
該視野有亮點，有問題的樣本與實現(xiàn)大家關(guān)注的焦點。


解決方案 ：小氣泡可能被困在聚光鏡的頂部和底部的顯微鏡載玻片之間的油。 取出的目鏡（或插入伯川德透鏡）觀察的后焦平面上的物鏡，其中的氣泡將是可見的。 為了彌補，打破油接觸，并用棉簽除去殘留的氣泡。清潔聚光鏡的前鏡頭與顯微鏡玻片上多余的油，然后申請一個干凈的滴油的鏡頭。 如果問題仍然存在，徹底清潔所有的光學表面，然后再重新將油。




問題： 
在高放大倍率，膠體粒子顯示不完整的牛頓環(huán)，并出現(xiàn)不均勻的照明。


解決方案 ：聚光鏡可能是偏離中心。 切換到低功耗的物鏡和中心聚光鏡。 仔細檢查，以確定更高的功率物鏡是否具有不同的中心，及若有，顯微鏡光軸中心的物鏡。