奧林巴斯顯微鏡：光源的種類(lèi)及波長(zhǎng)

在大多數(shù)熒光顯微鏡應(yīng)用，到達(dá)眼睛或其它檢測(cè)器，諸如視頻相機(jī)或光電倍增管的光子的數(shù)目，通常是非常低的。 這是因?yàn)榇蠖鄶?shù)的熒光量子產(chǎn)率是低的（量子產(chǎn)率的試樣所發(fā)出的量子數(shù)的比率相比，吸收的量子數(shù)）。 為了產(chǎn)生足夠的激勵(lì)光強(qiáng)度提交排放可檢測(cè)的，需要**的光源，通?；。?/span>燈）]是表示在圖1的例子相似的燈。 這些燈都充滿了高壓氣體，應(yīng)謹(jǐn)慎處理。

*常見(jiàn)的燈是汞燈，功率從50瓦到200瓦，而氙氣燈，從75瓦到150瓦不等。 在圖1中的汞燈燈泡由兩個(gè)電極密封在高壓下在石英玻璃外殼，其中也包含汞的。

這些光源通常是由直流電源提供足夠的啟動(dòng)電源點(diǎn)燃的燃燒器（由電離的氣態(tài)蒸氣），并保持它閃爍*低燃燒供電。 電源應(yīng)該有一個(gè)定時(shí)器，使燃燒器一直在使用的小時(shí)數(shù)來(lái)跟蹤。 弧光燈，失去效率和更容易碎裂，如果使用*出其額定壽命。 的汞燃燒器不提供甚至在整個(gè)頻譜強(qiáng)度從紫外到紅外（汞燃燒器的發(fā)射光譜的，請(qǐng)參閱圖2）。 汞燃燒器的強(qiáng)度的大部分被消耗在近紫外線，峰的強(qiáng)度，在313，334，365，406，435，546，和578納米。 在其他波長(zhǎng)的可見(jiàn)光，其強(qiáng)度是穩(wěn)定的，但幾乎沒(méi)有那么明亮，但仍可使用的藍(lán)光激發(fā)。它也應(yīng)該明白，單純的功率是不是*的考慮，確定亮度。

熒光燈規(guī)格

表1

另外一個(gè)重要的標(biāo)準(zhǔn)是圓弧的大小;包含的每單位面積的亮度的圓弧內(nèi)的目標(biāo)的背面孔徑是一個(gè)更好的措施的有用的燃燒器的亮度。 使用的標(biāo)準(zhǔn)，你會(huì)注意到，表1中列出的三種汞燃燒器，在100瓦的燃燒器（在其他條件相同）的三個(gè)是*亮的。 的燃燒器在您的選擇也很重要的是是否匹配的燃燒器的波長(zhǎng)的光譜強(qiáng)度峰值的熒光染料染色的標(biāo)本的激勵(lì)要求。 每當(dāng)被評(píng)估的照明系統(tǒng)，它是要考慮整個(gè)系統(tǒng)，包括聚集器透鏡和光圈和視場(chǎng)光闌的使用固定科勒照明。

做的汞的燃燒器（參見(jiàn)圖3）相比，在整個(gè)可見(jiàn)光譜的氙氣的燃燒器具有更均勻的強(qiáng)度，它們不具有非常高的光譜強(qiáng)度峰值，是汞的燃燒器的特征。 氙氣燈有缺陷中的紫外線;他們花費(fèi)相當(dāng)大的比重，它們的強(qiáng)度在幀內(nèi)紅色，因此，使用這種燈需要小心控制熱量。 短隙氙氣燃燒器通常是更可取的，因?yàn)樵搱A弧的大小是這樣的，它的光可以更容易地包括光圈的物鏡內(nèi)的背面，從而避免浪費(fèi)的光強(qiáng)度。

始終堅(jiān)持以安裝或更換汞或氙弧燈時(shí)，上面列出的安全程序。

汞燃燒器有200個(gè)小時(shí)的生命;氙氣燃燒器幾百小時(shí)。 頻繁通斷開(kāi)關(guān)可降低燈泡的使用壽命。 當(dāng)燃燒器達(dá)到額定壽命，頻譜輻射可能會(huì)改變，石英外殼減弱。

有時(shí)，鎢鹵燈的使用，尤其是藍(lán)色或綠色的激發(fā)與明亮的發(fā)光標(biāo)本。 它們的輸出是相對(duì)均勻，在整個(gè)可見(jiàn)光譜（圖4），它們是缺乏的近紫外光，也具有相對(duì)高的比例在紅外線強(qiáng)度。 這些燈并不需要昂貴的電源供應(yīng)器的點(diǎn)火，但都采用低電壓互感器，持續(xù)30到50小時(shí)的燈泡使用時(shí)，在其*大額定電壓。

近年來(lái)，出現(xiàn)了越來(lái)越多地使用的激光器 ，特別是氬離子激光具有**的發(fā)射能力在488和514納米。 盡管成本高，已成為激光光源，在激光掃描共聚焦顯微鏡特別有用。 有許多不同類(lèi)型的激光器，每個(gè)提供一個(gè)**的發(fā)射光譜。 圖5示出的兩個(gè)*常用的激光器，在熒光顯微鏡下的發(fā)光光譜。

有許多不同的設(shè)備，此技術(shù)已被證明是一個(gè)**的工具，提供非常尖銳的熒光圖像，通過(guò)巧妙地控制了焦光。 這是通過(guò)掃描和成像非常小，淺水區(qū)先后。 的試樣的光學(xué)部分被存儲(chǔ)在一臺(tái)計(jì)算機(jī)中，并重新恢復(fù)成整個(gè)圖像然后可以顯示在視頻監(jiān)視器上，或印有一個(gè)視頻打印機(jī)。

燈管對(duì)齊 - 顯微鏡公司可能會(huì)提供一個(gè)可選的定心屏幕，以方便的定心的燈弧的圖像的物鏡的背面孔徑。此附件，在其上端，標(biāo)準(zhǔn)的皇家顯微學(xué)會(huì)（RMS）線程和可以擰入物鏡轉(zhuǎn)換器。 它被放在那里，入光路旋轉(zhuǎn)。 附件的下表面具有磨砂處理，與內(nèi)切十字橙色玻璃。

灌進(jìn)從分色鏡的光撞擊內(nèi)置的定心屏幕反射，被反射到的十字準(zhǔn)線，如在圖6中示出。 當(dāng)你操縱的燈的聚光鏡旋鈕和定心的燈座上的螺絲，你可以移動(dòng)的圖像，使其為中心的十字線（圖7（a））。 可制成更大或更小的大小的圖像的圓弧通過(guò)操縱燈聚光鏡桿。 當(dāng)您完成定心配件，它可以被替換由定期的目的。 如果燈箱包含一個(gè)反射鏡，反射鏡的位置被調(diào)整，使得在鏡子電弧圖像電弧圖像本身平行且相鄰地定位，如在圖7（b）所示。

如果你沒(méi)有定心屏幕，按照下面的方法可以使用。 聚焦標(biāo)本與10倍的物鏡。 然后旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤(pán)顯微鏡的光路中，將一個(gè)空的開(kāi)口上物鏡轉(zhuǎn)盤(pán)。 將白色卡在載物臺(tái)上（到位的標(biāo)本），你會(huì)看到的形象投射到卡的弧。 通過(guò)操縱燈聚光鏡旋鈕和燈箱上的定心螺釘?shù)娜紵?，可以在中心的圖像的弧的顯微鏡的光軸。