徠卡顯微鏡:激光顯微切割的歷史

2020-09-04 09:56:19

激光顯微切割的精確分離的樣品,用聚焦的激光束的顯微鏡操控技術(shù)。這種技術(shù)提供了一個精確的和無污染的解決方案的單個細胞或組織的分離和篩選。今天,它是一個既定的方法,大量的應用,主要是在分子生物學,特別是核酸研究,神經(jīng)科學,發(fā)育生物學,癌癥研究,取證,蛋白質(zhì)組學,植物研究,切割細胞培養(yǎng)和單細胞隔離。

現(xiàn)代激光顯微切割技術(shù)有它的根在20 世紀。它已經(jīng)穩(wěn)步推進,多年來修改。下面的文章是從它的起源到今天的**的激光顯微切割的歷史的總結(jié)。

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從“Strahlenstich”的方法,以激光顯微切割

早在1912年,所謂的“Strahlenstich”方法被用來將光線聚焦在生物學和醫(yī)學顯微,標志著實驗,*終導致激光顯微切割(Tschachotin,1912)。

然而,這是1962年之前Bessis和伯雷特哈恩等人。輻照樣品紅寶石激光器(Bessis)的和紫外線激光束(伯雷特哈恩)切割組織。到那時,它已經(jīng)可以使用激光束作為顯微工具解剖造成重大損害周圍組織細胞,而不產(chǎn)生的電弧光(Bessis伯雷特哈恩,1962年,1962年)。

伊森伯格等。人。也應用這項技術(shù)為他們的實驗:一個萊茨Orhtplan程序顯微鏡的野生藍幟公司(現(xiàn)在徠卡顯微系統(tǒng)),一個高能量的氮激光,今天的紫外線激光的前體,是用于分離肌動蛋白和肌球蛋白纖維從的周圍的細胞質(zhì)(等人伊森貝里,1976)。

帕塔基等人在1987年,還出版了*的成績,他們的研究在激光顯微切割。在這里,組織進行生化實驗手冊制備取代的顯微鏡用激光單元的組合。這個零件包括? 2的脈沖激光和連續(xù)波氦氖激光。生成的N 2激光,氦氖激光被用來標記目標,并在紅色光譜范圍的光學調(diào)整所需的激光功率。在這里,激光能量被利用作為一個非常小的組織樣本(帕塔基等人,1978的分析工具。

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與以前的手工制備相比,用激光束切割的組織是在再現(xiàn)性方面帶來了巨大的改進,更高的精度和節(jié)省時間。

然而,在當時,科學家們與酶閑置切割邊緣的變化引起的問題。此外,這是*可能的進行光學分析,PCR(聚合酶鏈反應)技術(shù),仍是未知的。所以,雖然它已經(jīng)存在在上述與利時Orhtplan程序描述配置中,該技術(shù)在商業(yè)上不可行。其遙遙*,它陷入遺忘。

激光技術(shù)的進一步發(fā)展,導致突破

在九十年代中期,在此期間的技術(shù)進步已經(jīng)取得了使邁克爾·埃默特巴克和他的團隊在美國國立衛(wèi)生研究院和美國國家癌癥研究所(馬里蘭州貝塞斯達美國)開發(fā)另一個激光顯微切割技術(shù)。二氧化碳激光結(jié)合的聚合與一種透明的熱塑性膜(乙烯-醋酸乙烯酯聚合物),該技術(shù)涉及的透明的熱塑性塑料膜的應用程序的組織部分(完全與樣品接觸的表面),可以安裝在傳統(tǒng)的搏命。當聚合物用激光照射,加熱和液化,擴展到空腔中與它的組織切片和定影膜,從而將選擇的細胞/細胞聚集。這些可以被刪除從標本幻燈片(埃默特-巴克等人,1996)。

立即采用該系統(tǒng)的進一步發(fā)展和市場營銷大角與不同類型的細胞形態(tài)和表型的分離和分子分析的目的。漸漸地,進一步的系統(tǒng)出現(xiàn)在市場上,如棕櫚微束系統(tǒng)和LMD系統(tǒng)由徠卡顯微系統(tǒng)公司。

成立于各種各樣的應用的激光顯微切割

 

今天,徠卡公司的激光顯微切割系統(tǒng)在市場上使用,這也是一個堂堂正正的顯微鏡特別適用于細胞培養(yǎng)工作。徠卡顯微系統(tǒng)也是*的光學儀器公司已經(jīng)開發(fā)出一種專有的激光模塊,激光顯微切割原理。徠卡LMD系統(tǒng)的顯著特點是結(jié)合了**的激光控制和接觸和污染免費回收的dissectate材料的利用重力的作用。這樣的組合也從復雜的異構(gòu)組織提供迷人快速的收集純的起始材料。徠卡公司一直以來在市場上推出的徠卡在2000年的LMD,同時該公司已發(fā)行新一代激光顯微切割系統(tǒng)徠卡LMD6500和徠卡LMD7000的形式。

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激光顯微切割系統(tǒng)提供了廣泛的應用光譜分子生物學,特別是核酸研究,神經(jīng)科學,發(fā)育生物學,細胞培養(yǎng),癌癥研究,免疫學,法醫(yī)學,蛋白質(zhì)組學,植物和氣候研究。