• 什么是熒光顯微鏡？

    熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) ： 熒光顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對(duì)這

    2020-09-04

  • 常用于免疫熒光組織化學(xué)染色的熒光素

    常用于免疫熒光組織化學(xué)染色的熒光素有：異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC)、四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethyl rhodamine isothioeyanate，TRITC)、四乙基羅丹明(tetraethyl rhodamine B200，RB200)、得克薩斯紅(Texas red)、藻紅蛋白(phycoerythrin，PE)、花青類(c

    2020-09-04

  • 熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）

    活細(xì)胞研究遇到的問(wèn)題： 蛋白質(zhì)或其他分子在活細(xì)胞內(nèi)互相結(jié)合的時(shí)間和地點(diǎn)是了解它們功能的關(guān)鍵問(wèn)題。要回答這一問(wèn)題，需將蛋白質(zhì)標(biāo)上不同的熒光團(tuán)。但是，光學(xué)顯微鏡的分辨率將蛋白質(zhì)檢測(cè)精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質(zhì)成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方法，在供體和受體相互靠得很近（1-10 nm）時(shí)，將光子能從一個(gè)受激發(fā)的熒光團(tuán)（供體）轉(zhuǎn)移到另一個(gè)熒

    2020-09-04

  • 熒光顯微鏡檢測(cè)原理及方法

    熒光顯微鏡檢測(cè)方法一、熒光顯微鏡熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具.它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成.是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像(圖3-1). ?(一)光源 現(xiàn)在多采用200W的超高壓汞燈作光源,它是用石英玻璃制作,中間呈球形,內(nèi)充一定數(shù)量的汞,工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電,引起水銀蒸發(fā),球內(nèi)氣壓迅速升高,當(dāng)水銀完全蒸發(fā)時(shí),可達(dá)50～7

    2020-09-04

  • 如何制作熒光顯微鏡標(biāo)本

    一、熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求　　(一)載玻片　　載玻片厚度應(yīng)在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片?！　?二)蓋玻片　　蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片，它可以使熒光順

    2020-09-04

  • 奧林巴斯熒光顯微鏡使用方法

    這里將以?shī)W林巴斯BX53和BX43熒光顯微鏡為例，來(lái)做分析。System Microscope BX53 奧林巴斯和尼康的三波段激發(fā)的熒光濾光片組合包括兩個(gè)很精確的平衡組合(DAPI-FITC-TRITC和DAPI-FITC-Texas Red)，每個(gè)組合包括三個(gè)帶通的發(fā)射區(qū)域，可以選擇性的通過(guò)藍(lán)色、綠色、黃色、橙色和紅色光譜區(qū)的激發(fā)光。這樣的相互輔助作用就可以探究激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片光譜

    2020-09-04

  • 熒光顯微鏡技術(shù)

    顯微鏡光學(xué)技術(shù)對(duì)顯微結(jié)構(gòu)與顯微變化是極為重要的工具.熒光物質(zhì) ( 熒光染劑 ) 受到較短波長(zhǎng)的光 ( 如 FITC : Ex:488 nm ) 及足夠的能量所激發(fā), 當(dāng)要回到穩(wěn)態(tài)的能階時(shí), 會(huì)釋出較長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光 ( 如 FITC : Em : 515 nm ), 非熒光物質(zhì)則成為黑色的背景.自體熒光 ( auto-fluorescence )又稱為主要熒光 ( primary fluorescen

    2020-09-04

  • 徠卡顯微鏡熒光觀察法

    熒光觀察法在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣泛的用途，如免疫學(xué)研究的對(duì)象是抗原和抗體的反應(yīng)問(wèn)題，由于抗體反應(yīng)的高度特異性，所以當(dāng)抗原體發(fā)生反應(yīng)時(shí)，只要知道其中一個(gè)因子，也就可以知道另一個(gè)因子。但是這個(gè)過(guò)程必須通過(guò)染色，熒光染色劑就應(yīng)運(yùn)而生。由于熒光染色的色素只需極稀的濃度便能使激發(fā)出明亮的熒光。因而，染色后不會(huì)破壞抗體（或抗原）原有的特異活性。其光學(xué)原理示意圖如下，以藍(lán)光激發(fā)為例：激發(fā)濾光片

    2020-09-04