• 尼康顯微鏡：多色共聚焦顯微鏡的光學(xué)像差和物鏡選擇

    優(yōu)化的設(shè)計(jì)簡(jiǎn)化了激光共聚焦顯微鏡的程度上，它已經(jīng)成為一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞生物學(xué)研究工具。然而，激光共聚焦顯微鏡變得更加強(qiáng)大，他們也變得更加苛刻的光學(xué)元件的。事實(shí)上，導(dǎo)致圖像質(zhì)量的細(xì)微瑕疵廣角鏡的光學(xué)像差可以產(chǎn)生毀滅性的影響，在激光共聚焦顯微鏡。不幸的是，通常是隱藏的嚴(yán)格的光學(xué)要求，激光共聚焦顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)，保證了一個(gè)清晰的圖像，即使在顯微鏡是表現(xiàn)不佳。光學(xué)制造商提供了廣泛的顯微鏡物鏡，分別為特定應(yīng)用設(shè)

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：EPI-熒光照明光路

    直到最近，熒光照明是一個(gè)選項(xiàng)僅適用于配備專門的高數(shù)值孔徑物鏡的研究級(jí)復(fù)合顯微鏡。這一技術(shù)在立體顯微鏡的需要不斷升級(jí)與引進(jìn)的編碼基因和生物特異性熒光蛋白GFP（綠色熒光蛋白）等。體視顯微鏡的應(yīng)用GFP觀察現(xiàn)在是如此普遍，立體聲熒光照明，更經(jīng)常被稱為GFP照明，即使他們可以利用許多其他應(yīng)用在生命科學(xué)和電子制造業(yè)。大幼蟲(chóng)，線蟲(chóng)，斑馬魚(yú)，卵母細(xì)胞和成熟的昆蟲(chóng)標(biāo)本，如可以方便地選擇和操作時(shí)，他們GFP標(biāo)記的

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：在多光子激發(fā)顯微術(shù)的基本原理和應(yīng)用

    雙光子激發(fā)顯微鏡（也稱為非線性的，多光子或雙光子激光掃描顯微鏡）是一種替代共聚焦和去卷積顯微鏡三維成像，提供了明顯的優(yōu)勢(shì)。特別是，雙光子激發(fā)成像擅長(zhǎng)的活細(xì)胞，尤其是在完整的組織，如腦切片，胚胎，整個(gè)器官，甚至整個(gè)動(dòng)物。有效靈敏度的熒光顯微鏡，特別是與厚的樣品，通常是有限的焦點(diǎn)外的喇叭形。此限制，大大降低了在共聚焦顯微鏡中，通過(guò)使用共焦針孔拒絕焦點(diǎn)外的背景熒光，并產(chǎn)生?。ㄐ∮?微米），unblurr

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：隨機(jī)光學(xué)重建顯微鏡（STORM）

    所提供的寬視場(chǎng)的多個(gè)成像模式中，激光點(diǎn)掃描共聚焦，多光子熒光顯微鏡允許非侵入性的，固定和活細(xì)胞和組織中有高水平的特異性生化時(shí)間分辨成像。盡管傳統(tǒng)的熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)，該技術(shù)在超微結(jié)構(gòu)的調(diào)查，由于光的衍射，可以與標(biāo)準(zhǔn)的目標(biāo)捕獲的信息量限制設(shè)置的分辨率極限的阻礙。在過(guò)去的幾年中，已經(jīng)采用了一些新穎的儀器為基礎(chǔ)的方法來(lái)規(guī)避衍射極限，包括近場(chǎng)掃描光學(xué)顯微鏡（NSOM），受激發(fā)射損耗（STED）顯微鏡，

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：顯微物鏡的屬性

    三個(gè)關(guān)鍵的設(shè)計(jì)特點(diǎn)的物鏡顯微鏡的極限分辨率極限。這些包括用來(lái)照亮試樣的孔徑角的光錐物鏡捕獲，和對(duì)象空間中的物鏡前透鏡和被檢體之間的折射率的光的波長(zhǎng)。圖1中顯示的是通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)單的雙透鏡的阿貝聚光照明顯微鏡的物鏡的剖開(kāi)圖。光通過(guò)聚光鏡被組織成一個(gè)光錐到樣品上發(fā)出，然后被發(fā)送到物鏡前透鏡元件作為反錐形。照明錐的大小和形狀是一個(gè)函數(shù)的組合的物鏡和聚光鏡的數(shù)值孔徑。物鏡的孔徑角是由希臘字母θ表示，將在下面詳

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡，什么是共振掃描激光共聚焦顯微鏡？

    激光掃描共聚焦顯微鏡已被證明是對(duì)固定和染色的細(xì)胞，組織中一個(gè)有用的工具，甚至整個(gè)生物體的光來(lái)源于區(qū)域從焦平面將消除高對(duì)比度。熒光蛋白在活細(xì)胞成像，然而越來(lái)越多的應(yīng)用，現(xiàn)在需要顯微鏡的成像速度為毫秒級(jí)解開(kāi)在許多生物過(guò)程中發(fā)生的復(fù)雜的動(dòng)力學(xué)。不幸的是，傳統(tǒng)的激光掃描共聚焦顯微鏡由電流計(jì)鏡有限的采集速度，這是一個(gè)線性鋸齒控制信號(hào)以每像素幾微秒的速度驅(qū)動(dòng)。這意味著掃描速率范圍從500毫秒到2秒，取決于圖像

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡，偏振光的干擾

    在顯微鏡的圖像的形成依賴于兩個(gè)關(guān)鍵的光學(xué)現(xiàn)象：衍射和干涉之間復(fù)雜的相互作用。 的標(biāo)本的光通過(guò)散射和衍射成微小的細(xì)節(jié)和功能存在于試樣中的發(fā)散波的。 由試樣散射的光的發(fā)散被捕獲的目標(biāo)和聚焦到中間圖像平面，其中疊加的光波通過(guò)的過(guò)程中， 干擾重組或求和，以產(chǎn)生一個(gè)放大的圖像的標(biāo)本。發(fā)生的衍射和干涉的表面上密切的關(guān)系，因?yàn)樗鼈儗?shí)際上是表現(xiàn)為相同的物理過(guò)程，并產(chǎn)生表面上是相互影響的。 我們大多數(shù)人觀察到某種類

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡，熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）顯微鏡與熒光蛋白的基本原理

    在活細(xì)胞中，動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì)之間的相互作用被認(rèn)為是發(fā)揮了關(guān)鍵作用，調(diào)節(jié)許多信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，以及廣泛的其他關(guān)鍵流程。 在過(guò)去，經(jīng)典的生物化學(xué)方法，闡明了這種相互作用的機(jī)制是司空見(jiàn)慣，但是弱的或短暫的相互作用，可能會(huì)發(fā)生細(xì)胞內(nèi)的天然環(huán)境是這些技術(shù)通常是透明的。 例如，合作一直懷疑蛋白本地化合作伙伴使用固定細(xì)胞免疫熒光顯微鏡檢查相互作用在原地 ，并已提交了大量的文獻(xiàn)報(bào)道基于這種技術(shù)的常用方法。 然而，由于在

    2020-09-04