• 徠卡顯微鏡FRET與FLIM定量在體內(nèi)生物化學(xué)

    熒光壽命是多久熒光團(tuán)保留在平均在激發(fā)態(tài)通過發(fā)射熒光光子返回到基態(tài)之前的量度。它依賴于熒光團(tuán)的分子的組合物和納米環(huán)境。FLIM結(jié)合壽命測(cè)量與成像：為每個(gè)圖像像素獲得的壽命是顏色編碼，以產(chǎn)生更多的圖像對(duì)比度。因此，F(xiàn)LIM有關(guān)其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息提供關(guān)于熒光分子的空間分布的信息一起。FLIM的一個(gè)典型應(yīng)用是FLIM-FRET。FRET是一個(gè)行之有效的方法來研究分子間的相互作用。它審視蛋白結(jié)合，并

    2020-09-04

  • 熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）

    活細(xì)胞研究遇到的問題： 蛋白質(zhì)或其他分子在活細(xì)胞內(nèi)互相結(jié)合的時(shí)間和地點(diǎn)是了解它們功能的關(guān)鍵問題。要回答這一問題，需將蛋白質(zhì)標(biāo)上不同的熒光團(tuán)。但是，光學(xué)顯微鏡的分辨率將蛋白質(zhì)檢測(cè)精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質(zhì)成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方法，在供體和受體相互靠得很近（1-10 nm）時(shí)，將光子能從一個(gè)受激發(fā)的熒光團(tuán)（供體）轉(zhuǎn)移到另一個(gè)熒

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：熒光激發(fā)塊的分類

    落射熒光的干擾和吸收濾色鏡組合被安置在濾色鏡立方體（或光學(xué)塊），并包括激發(fā)濾光片，二色性分束器（通常稱為反光鏡），和光柵（或發(fā)射）的濾色鏡，如在圖1中示出（一）。使用本指南中選擇適當(dāng)?shù)臑V色鏡設(shè)置為廣角熒光顯微鏡調(diào)查所用的發(fā)色團(tuán)的激發(fā)和發(fā)射光譜特性相匹配。作為一個(gè)例子，圖1（b）給出一個(gè)典型的高性能帶通發(fā)射藍(lán)光激發(fā)濾色鏡組合的光譜。尼康熒光濾光器組合中所提供窄，中，寬的通帶激發(fā)版本與相應(yīng)的發(fā)射濾色鏡

    2020-09-04

  • 徠卡顯微鏡：全內(nèi)反射熒光顯微鏡（TIRF）

    全內(nèi)反射熒光（TIRF）是一種特殊的技術(shù)，在20世紀(jì)80年代初在安阿伯市密歇根大學(xué)的丹尼爾·阿克塞爾羅德在熒光顯微鏡。全內(nèi)反射熒光顯微鏡提供的圖像具有出色的高軸向分辨率低于100納米。這允許與膜相關(guān)的過程的觀察。 全內(nèi)反射熒光顯微鏡它允許靠近的玻璃/水（或玻璃/試樣）接口的熒光分子成像。這是通過采用的漸逝波通過交付的弧光燈，發(fā)光二極管（LED）或激光的光激發(fā)的熒光基團(tuán)，而不是直接照明。如果入射的光

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)

    迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛，并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中，最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞器，和其他細(xì)胞區(qū)室，以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù)，其中包括寬視場(chǎng)，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性，提供了一個(gè)

    2020-09-04

  • 徠卡顯微鏡：螢光蛋白及熒光計(jì)時(shí)器

    術(shù)語(yǔ)“螢光蛋白”結(jié)合了一組基因改變的熒光蛋白，具有非常特殊的屬性：它們可以從一個(gè)非熒光狀態(tài)激活，他們可以改變他們的發(fā)射光譜或進(jìn)行切換和關(guān)閉，他們甚至能夠“為很多次。此行為是由于一些獨(dú)特的照片的物理屬性。在單分子水平，許多熒光蛋白顯示閃爍的活動(dòng)可以由外部照明的影響的特性。有明顯分別發(fā)射和非發(fā)射新的發(fā)射狀態(tài)，所表達(dá)的內(nèi)容屬性光可活化，photoconvertible的的或光開關(guān)，光學(xué)熒光筆蛋白突變的熒

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：維持活細(xì)胞顯微鏡載物臺(tái)上

    越來越多的調(diào)查，使用活細(xì)胞成像技術(shù)的基本性質(zhì)，細(xì)胞和組織的功能，特別是由于目前正在目睹熒光蛋白合成熒光技術(shù)的快速進(jìn)步提供重要的洞察。由于這些進(jìn)步，活細(xì)胞成像已經(jīng)成為必要的分析工具，在大多數(shù)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，以及一個(gè)常規(guī)的方法，在廣泛領(lǐng)域的神經(jīng)生物學(xué)，發(fā)育生物學(xué)，藥理學(xué)，和許多其他相關(guān)的生物醫(yī)學(xué)研究的學(xué)科實(shí)line。其中最重要的技術(shù)挑戰(zhàn)進(jìn)line成功的活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)是細(xì)胞維持在一個(gè)健康的狀態(tài)，并合成

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)

    迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛，并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中，最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞器，和其他細(xì)胞區(qū)室，以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù)，其中包括尼康顯微鏡，寬視場(chǎng)，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性

    2020-09-03