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徠卡顯微鏡：熒光蛋白 - 從入門到諾貝爾獎
熒光蛋白是最近熒光顯微鏡及其現(xiàn)代應用的根本。他們的發(fā)現(xiàn)和隨后的發(fā)展是最令人興奮的創(chuàng)新在上個世紀的生命科學和無數(shù)自然現(xiàn)象破譯的起點之一。這篇文章是獻給誰參與了熒光蛋白的命運輸入其科學的參與到人。它應該給一個最美麗的生化工具，從一開始到諾貝爾獎的漫長道路的洞察。?????早期的熒光觀察熒光蛋白的人的興趣可以追溯到公元一世紀時，羅馬自然哲學家老普林尼描述[?1?]（蓋烏斯皮林紐斯Secundus，公元2
2020-09-04
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尼康顯微鏡：在多光子激發(fā)顯微術的基本原理和應用
雙光子激發(fā)顯微鏡（也稱為非線性的，多光子或雙光子激光掃描顯微鏡）是一種替代共聚焦和去卷積顯微鏡三維成像，提供了明顯的優(yōu)勢。特別是，雙光子激發(fā)成像擅長的活細胞，尤其是在完整的組織，如腦切片，胚胎，整個器官，甚至整個動物。有效靈敏度的熒光顯微鏡，特別是與厚的樣品，通常是有限的焦點外的喇叭形。此限制，大大降低了在共聚焦顯微鏡中，通過使用共焦針孔拒絕焦點外的背景熒光，并產(chǎn)生薄（小于1微米），unblurr
2020-09-04
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徠卡顯微鏡：活細胞成像技術
復雜和/或快速的細胞動力學的理解是探索生物過程的一個重要步驟。因此，今天的生命科學研究越來越注重動態(tài)過程，如細 胞遷移，細胞，器官或整體動物形態(tài)學變化和生理（如細胞內的離子成分的變化）事件實時的活標本。解決這些具有挑戰(zhàn)性的需求的方法之一是采用若干統(tǒng)稱活細胞成像的光學方法?；罴毎上窕罴毎膭恿W過程，而不是給細胞的當前狀態(tài)的一個“快照” -允許調查將改編成電影的快照?；罴毎上裉峁┝丝臻g和時間信息
2020-09-04
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尼康顯微鏡：隨機光學重建顯微鏡（STORM）
所提供的寬視場的多個成像模式中，激光點掃描共聚焦，多光子熒光顯微鏡允許非侵入性的，固定和活細胞和組織中有高水平的特異性生化時間分辨成像。盡管傳統(tǒng)的熒光顯微鏡的優(yōu)點，該技術在超微結構的調查，由于光的衍射，可以與標準的目標捕獲的信息量限制設置的分辨率極限的阻礙。在過去的幾年中，已經(jīng)采用了一些新穎的儀器為基礎的方法來規(guī)避衍射極限，包括近場掃描光學顯微鏡（NSOM），受激發(fā)射損耗（STED）顯微鏡，
2020-09-04
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尼康顯微鏡，熒光共振能量轉移（FRET）顯微鏡與熒光蛋白的基本原理
在活細胞中，動態(tài)的蛋白質之間的相互作用被認為是發(fā)揮了關鍵作用，調節(jié)許多信號轉導通路，以及廣泛的其他關鍵流程。 在過去，經(jīng)典的生物化學方法，闡明了這種相互作用的機制是司空見慣，但是弱的或短暫的相互作用，可能會發(fā)生細胞內的天然環(huán)境是這些技術通常是透明的。 例如，合作一直懷疑蛋白本地化合作伙伴使用固定細胞免疫熒光顯微鏡檢查相互作用在原地 ，并已提交了大量的文獻報道基于這種技術的常用方法。 然而，由于在
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡，熒光和生物發(fā)光蛋白
生物體的廣譜能夠通過生化機制，包括螢火蟲，水母和某些細菌發(fā)光的。 一些這些生物體的發(fā)射光通過吸收特定波長的光，而其他通過消耗身體內儲存的能量發(fā)射光。熒光蛋白通過吸收和重新發(fā)射的光的能量發(fā)出熒光。 水母，珊瑚，?？湍承┘毦凶约旱纳眢w內這種蛋白質。 另一方面，生物發(fā)光來源于體內的化學反應;實例包括夜光屬的螢火蟲和物種。 發(fā)光物質要么是位于細胞（螢火蟲和夜光 ）內或分泌到外部（Cypridinac
2020-09-04
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尼康顯微鏡Lambda堆棧的基本概念
類似的概念來使用的激光掃描共聚焦或解卷 積顯微術高數(shù)值孔徑物鏡較厚的標本中獲得的光學部分 （ 或 z棧）中，lambda堆棧的三維數(shù)據(jù)集，它由使用相同的試樣場的圖像采集在不同的波長帶，每一個橫跨有限的光譜區(qū)域范圍從2到20納米的獲取。 相反，在各種形式的光學顯微鏡的典型成像方案涉及在檢測器的整個波長響應頻帶獲取單個圖像（或一個連續(xù)組中的延時實驗圖像）。 本教程探討一個lambda棧的頻譜分量。教程
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡的熒光共振能量轉移（FRET）
初級概念特定分子種類之間的相互作用的活細胞中的精確位置和性質是在生物學研究的許多領域主要關心的，但是調查經(jīng)常被用來研究這些現(xiàn)象的文書的分辨率有限的阻礙。 常規(guī)寬視場熒光顯微鏡使在由瑞利判據(jù)，約200納米（0.2微米）所定義的光空間分辨率極限本地化熒光標記的分子。 然而，為了理解所涉及的典型的生物分子的過程蛋白伙伴之間的物理相互作用，分子的相對接近度，必須更精確地確定比衍射限制的
2020-09-04