• 激光掃描共聚焦顯微鏡的原理和應(yīng)用

    一、激光掃描共聚焦顯微鏡的原理傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場(chǎng)光源，標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會(huì)受到鄰近點(diǎn)的衍射或散射光的干擾；激光掃描共焦顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM)采用點(diǎn)光源照射樣本，在焦平面上形成一個(gè)輪廓分明的小的光點(diǎn)，該點(diǎn)被照射后發(fā)出的熒光被物鏡搜集，并沿原照射光路回送到由雙色鏡構(gòu)成的分光器。分光器將熒光直接送到探測(cè)器。光源和探測(cè)器前方都各

    2020-09-04

  • 常用于免疫熒光組織化學(xué)染色的熒光素

    常用于免疫熒光組織化學(xué)染色的熒光素有：異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC)、四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethyl rhodamine isothioeyanate，TRITC)、四乙基羅丹明(tetraethyl rhodamine B200，RB200)、得克薩斯紅(Texas red)、藻紅蛋白(phycoerythrin，PE)、花青類(c

    2020-09-04

  • 熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）

    活細(xì)胞研究遇到的問(wèn)題： 蛋白質(zhì)或其他分子在活細(xì)胞內(nèi)互相結(jié)合的時(shí)間和地點(diǎn)是了解它們功能的關(guān)鍵問(wèn)題。要回答這一問(wèn)題，需將蛋白質(zhì)標(biāo)上不同的熒光團(tuán)。但是，光學(xué)顯微鏡的分辨率將蛋白質(zhì)檢測(cè)精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質(zhì)成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方法，在供體和受體相互靠得很近（1-10 nm）時(shí)，將光子能從一個(gè)受激發(fā)的熒光團(tuán)（供體）轉(zhuǎn)移到另一個(gè)熒

    2020-09-04

  • 奧林巴斯顯微鏡：熒光的基本概念

    熒光是敏感，其中創(chuàng)建的物理（例如，光的吸收），機(jī)械（摩擦），或化學(xué)機(jī)制從電子激發(fā)態(tài)的分子發(fā)光的無(wú)處不在的發(fā)光過(guò)程家族的成員。通過(guò)由紫外線或可見(jiàn)光的光子的分子的激發(fā)發(fā)光發(fā)電的是這樣一種現(xiàn)象稱為光致發(fā)光，正式分為兩大類，熒光和磷光，這取決于激發(fā)態(tài)的電子組態(tài)和排放路徑。熒光是一些原子和分子的屬性，在一個(gè)特定的波長(zhǎng)吸收光，并隨后經(jīng)過(guò)短暫的時(shí)間間隔更長(zhǎng)的波長(zhǎng)的光發(fā)射被稱為熒光壽命。發(fā)生的方法的磷光熒光的方式

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：活細(xì)胞成像的培養(yǎng)室

    標(biāo)本室是一個(gè)不可或缺的關(guān)鍵分支，在活細(xì)胞成像的歷史和廣泛的設(shè)計(jì)描述系統(tǒng)，提供卓越的光學(xué)性能，同時(shí)允許不同時(shí)間量要保持標(biāo)本多年來(lái)已經(jīng)發(fā)布。從密封蓋玻片載玻片上，使幾乎所有的環(huán)境變量的嚴(yán)格控制到復(fù)雜的灌注室編寫(xiě)的簡(jiǎn)單的復(fù)雜程度不等，培養(yǎng)室被設(shè)計(jì)為，允許活標(biāo)本觀察微創(chuàng)高分辨率。不管他們的設(shè)計(jì)，活細(xì)胞成像室必須滿足各種要求，才能被成功地應(yīng)用在實(shí)驗(yàn)中。應(yīng)易于消毒室，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境完全隔離觀察期間盡量減少暴露在污

    2020-09-04

  • 奧林巴斯顯微鏡：熒光激發(fā)和發(fā)射基本面概述

    由于其新穎的電子配置，熒光染料有獨(dú)特的特征吸收光譜（通常是類似的激發(fā)）和發(fā)射。這些吸收光譜和發(fā)射光譜表明相對(duì)強(qiáng)度的熒光，與經(jīng)典的相對(duì)強(qiáng)度與波長(zhǎng)在橫軸上繪制在垂直軸。對(duì)于一個(gè)給定的熒光染料，制造商指示的照明激發(fā)光強(qiáng)度和熒光的發(fā)光強(qiáng)度的峰值波長(zhǎng)為峰值波長(zhǎng)。重要的是要了解顯示對(duì)于一個(gè)給定的熒光染料的激發(fā)和發(fā)射光譜的圖表和曲線的原點(diǎn)。為了確定一個(gè)特定的熒光染料的最大吸收波長(zhǎng)（通常是相同的激發(fā)最大值）的發(fā)射

    2020-09-04

  • 尼康顯微鏡：熒光共聚焦顯微鏡的關(guān)鍵環(huán)節(jié)

    我們都知道，熒光顯微照片顯示的位置在一個(gè)組織的標(biāo)記分子，對(duì)嗎？好吧，也許不是。事實(shí)上，所有你可以的真的確定測(cè)量與大多數(shù)激光掃描共聚焦顯微鏡，熒光模式是在一個(gè)特定的時(shí)間收集的光子數(shù)量的某些功能。我們希望這是一個(gè)準(zhǔn)確的衡量一個(gè)或兩個(gè)有趣的參數(shù) - 本地物濃度或當(dāng)?shù)氐碾x子濃度。事實(shí)上，許多因素會(huì)影響實(shí)際存儲(chǔ)在計(jì)算機(jī)內(nèi)存中，在任何給定時(shí)刻的數(shù)值。甲圖1中所示的流程圖的一個(gè)通用的激光掃描共聚焦顯微鏡，示出一

    2020-09-03

  • 尼康顯微鏡熒光蛋白簡(jiǎn)介

    最終在20世紀(jì)60年代初發(fā)現(xiàn)了綠色熒光蛋白在細(xì)胞生物學(xué)預(yù)示著一個(gè)新的時(shí)代，使調(diào)查人員運(yùn)用分子克隆方法，融合多種蛋白質(zhì)和酶的目標(biāo)熒光團(tuán)部分，以在生物系統(tǒng)中監(jiān)控細(xì)胞過(guò)程用光學(xué)顯微鏡和相關(guān)的方法。?當(dāng)加上廣角熒光和共聚焦顯微鏡最近的技術(shù)進(jìn)步，包括超快的低光數(shù)碼相機(jī)和激光控制系統(tǒng)multitracking，綠色熒光蛋白，它的顏色轉(zhuǎn)移的遺傳衍生工具已在成千上萬(wàn)的活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)展示了寶貴的服務(wù)。?下村修和弗蘭

    2020-09-03